中药和制药微生物学实验共71页.pptVIP

实验一药品的微生物限度检查(一) 实验室常用消毒灭菌设备 空气和皮肤细菌检查方法 目的要求: 1、了解微生物学实验室常用消毒灭菌仪器设备 2、了解空气、皮肤细菌检査方法 3、掌握药品的微生物学检验程序和方法  药品的微生物限度检查(一) 1口服药物的微生物检查:①大肠杆菌的检查: ②细菌总数的检查 2外用药物的微生物检查:①绿脓杆菌的检查 ②金黄色葡萄球菌的检査:  药品的微生物限度检查实验方法(一) 1.药品的预处理 口服 2克药品加20毫升生理盐水, 外用 研磨制成悬液 2细菌培养 外服 药品混悬液10毫升加入胆盐乳糖增菌液中137℃24小时 药品混悬液10毫升加入亚碲酸钠增菌液中 口用药药品混悬液10亳升加入胆盐乳糖增菌液中+37℃24小时  3细菌总数测定 将剩氽口服焉以101102103104进行稀释(以生 理盐水稀释) 9m生理盐水 取三个中试管一各管加9m生理盐水 凵 从剩余10m悬液中取1ml 1ml 加入第一个稀释管中 1m101 102 103 从上述三个稀释管中各取1ml 10 10 加溶化的琼脂培养基中,混匀,冷却后,置37℃恒温培养箱培养24小时。  二空气、皮肤细菌检查方法验证) 三微生物学实验室常用消毒灭菌仪器设备: 高压蒸汽灭菌锅 消毒煮沸器 G6玻璃滤菌器装置 洁净工作台 移动式紫外光灯 鼓风式干烤箱 紫外线杀菌标本。  催化剂(钯粒) 通冒 厌氧工作站 厌氧培养罐—电热恒温培养箱二氧化碳培养箱  实验二药品的微生物限度检查(二 细菌的形态学检查及培养接种技术 目的要求:1、了解细菌培养接种技术 2、掌握细菌基本形态 3、掌握药品的微生物学检验程序和方法 实验内容 1药物的微生物限度检查(二) 2空气、皮肤细菌检查结果测定 3讲授基础培养基的制备方法(营养琼脂、营养肉汤) 4培养基的种类和用途 普通培养基、营养培养基、厌氧培养基、选择培养基 5细菌在三种不同物理性状培养基上的接种方法(基本技能 液体培养基 平板培养基 斜面培养基 双糖含铁半固体斜面培养基 6.显微镜下观察 细菌的基本形态:球菌、枯草杆菌、霍乱弧菌 特殊结构:肺炎荚膜、变形鞭毛、破伤风芽胞。  ※一、空气、皮肤的细菌检查结果 记录空气微生物培养结果(要记录本人所在实验台的 结果) 菌落大小、边缘、颜色、粗糙(光滑) 2、记录皮肤微生物培养结果(要记录本人的实验结果) 比较消毒前后细菌菌落数,菌落特点  ※二、培养基的制备 培养基分类 根据物理性状分类:「液体培养基 主要用于增菌 半固体培养基用于检测动力及保存菌种 固体培养基 用于分离鉴定细菌 根据用途分类 基础培养基 普通琼脂培养基 营养培养基 血液琼脂培养基 选择培养基 SS培养基 鉴别培养基 双糖铁培养基 厌氧培养基 庖肉培养基  ※培养基的制备程序 ※调配→矫正pH(7.0-7.6)→分装→灭菌(121.3℃, 20-30分钟)→放入冰箱冷藏备用。 因高压之后pH值会下降0.1左右,所以矫正pH时应比 所需的pH高。 鉴定是否有菌可将培养基置于37℃培养24小时,然 后观察。