动物细胞融合与单克隆抗体的制备课件.ppt

科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高， 特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 单克隆抗体制备的过程 1、细胞融合后得到哪些杂交细胞 ？哪种是我们需要的？ 骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞、B淋巴细胞与B淋巴细胞、骨髓瘤细胞与B淋巴细胞。 2、对得到的杂交瘤细胞需要做哪些处理？ 筛选、克隆化培养、专一抗体检验 3、在单克隆抗体制备的过程中要经过几次筛选，作用是什么？ 第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞 第二次筛选：再筛选出能产生特异性抗体的细胞群 第一次筛选 第二次筛选 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高， 特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 * 动物细胞融合与单克隆抗体抗体 人民教育出版社 生物选修3 高二下学期 科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高， 特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 单克隆抗体制备的过程 1、细胞融合后得到哪些杂交细胞 ？哪种是我们需要的？ 骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞、B淋巴细胞与B淋巴细胞、骨髓瘤细胞与B淋巴细胞。 2、对得到的杂交瘤细胞需要做哪些处理？ 筛选、克隆化培养、专一抗体检验 3、在单克隆抗体制备的过程中要经过几次筛选，作用是什么？ 第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞 第二次筛选：再筛选出能产生特异性抗体的细胞群 第一次筛选 第二次筛选 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高， 特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 治疗HER2过度表达的转移性乳腺癌 用于血浆中的狂犬病毒和抗体水平的检测 一、动物细胞融合 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 已成功的动物细胞融合的实例 酵母菌与鸡的血红细胞 人的腹水癌细胞与胡萝卜细胞 人的纤维肉瘤细胞与小鼠畸胎瘤细胞 抗原 刺激 浆细胞 抗体 特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏 传统血清抗体的制备途径： 二、单克隆抗体 动物体 传统血清抗体的制备的缺陷： 化学性质单一、纯度高、特异性强 单个B淋巴细胞通过克隆形成细胞群 单克隆抗体的概念 二、单克隆抗体 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 杂交瘤细胞 既能分泌一种特异性抗体，又能无限增殖 科学家米尔斯坦和科勒的设计方案： 怎样解决B淋巴细胞不能无限增殖的难题呢？ 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 单克隆抗体制备的过