畜禽繁育技术 模块四家畜生殖基础、畜禽繁育技术 实训4生殖激素作用（小鼠超排）课件.ppt

实训四、生殖激素作用（小鼠排） 一、目的和要求 1.通过实验及操作，使学生了解生殖激素PMSG、HCG对卵巢机能的生理作用，训练学生进行小动物剖解实操能力。 2.掌握超数排卵的基本方法。 实训四、生殖激素作用（小鼠超排） 二、材料与器械 1.取健康无伤残的18～23日龄(即将达到性成熟日龄)、体重9～13 g同源雌幼小鼠。各测试组内的实验鼠出生日龄相差不得超过3 d，体重相差不得超过3 g。 2.激素及药品PMSG、HCG、0.9％NaCl、75％酒精、碘酒等。 3.器械及用具：lml注射器、4号针头、0．1ml微量注射器、lml和2ml吸管、酒精棉球、生理盐水、剪子、大号镊子、带齿小镊子、鼠解剖台(或用小木板及图钉)、玻璃片(20cm×30cm)、鼠罐、小玻瓶。 4.电子天平 三、实验原理 孕马血清促性腺激素PMSG是由怀孕母马（驴）子宫内膜杯状细胞所分泌的一种糖蛋白激素，兼有促卵泡素FSH和促黄体素LH双重生物学活性，作用于即将达到性成熟年龄的雌幼小鼠，促进卵巢上多卵泡的生长发育，生长卵泡能分泌雌激素。在雌激素的作用下，又促进了小鼠子宫、卵巢及整个生殖器官会很快发育、增大。PMSG在机体内的作用期长。因此只需作一次注射。HCG也属胎盘促性腺激素，其作用主要是促进成熟卵泡排卵。 四、方法步骤 1.超排注射 （1）设对照组,在每次给各测试组小鼠注射的同时，对照组注射同样剂量的生理盐水。 （2）注射剂量：分别用PMSG 30IU、20IU、10IU给三批小鼠注射。同剂量的HCG于隔天后注射。 （3）注射部位：按照各组要求的药物剂量，准确地注射于小鼠的皮下。注意不得将药液注射于胸腔或腹腔内，亦不可溢漏于体表。 （4）注射方法：两人配合，一人用手指捏住小鼠的头及尾部固定后，另一人以酒精棉球消毒其背部，提起皮肤，将注射针头平插刺人皮下，将针头微向上挑起不露出针尖时，再注入药物。随着药物的推入，在皮下可看到鼓起一个小泡，即证实药物确已注入皮下部位。注射针头宜选用小号细针头，以防止注射后的药液从针孔处逸出。 2.剖检 （1）剖检时间：测试小鼠应在注射药物后的72～76h内进行。 （2）剖检步骤： 处死小鼠：采用颈椎脱臼法处死小鼠。将小鼠头部固定，用力牵拉鼠尾，可感到颈椎部位脱臼的振动。也可采用将小鼠头部撞击致死。然后用图钉将小鼠呈仰卧姿势固定于小木板上或鼠解剖台上。 剖腹：将处死并固定好的小鼠，沿腹中线剪开腹腔，向前方揭去肠胃内脏，即可在肾脏后方看到两侧呈乳白色的卵巢及与输尿管相平行的两子宫角。 组织剥离：将卵巢及子宫周围的组织剥离，于膀胱后的阴道段剪断，夹住膀胱向上提起，即可将子宫及卵巢摘出。 剔除附属组织：按各测试组的顺序，将摘出的子宫平置于玻璃板上，剔除子宫周围的附属组织。为了防止子宫干涸，可滴上数滴生理盐水浸润。 3.观察卵巢变化情况，记录排卵点并用电子天平称量每个小鼠子宫和卵巢的重量 五、实训报告 1.填写激素注射日程表(详见实训指导） 2.填写剖检记录(详见实训指导） 3.分析实训结果，总结实训各项工作的要点。