DB13∕T 1091-2009 饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定 分光光度法(河北省).pdf

ICS 65.120 B46 DB13 河北省地方标准 DB13/T 1091-2009 饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定 分光光度法 2009-06-17 发布 2009-07-02 实施 河北省质量技术监督局发布 DB 13fT 1091-2009 前言 本标准由河北省畜牧兽医局提出。 本标准起草单位:河北省饲料产品质量监督检验站、石家庄市畜产品质量监测中心。 本标准主要起草人:武英利、王萍、左晓磊、王作艳、闰超、武利勇。 DB13/T 1091-2009 饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定 一一分光光度法 1 范围 本标准规定了饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的单位定义和测定方法。 本标准适用于饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定。 2 规范性引用文件 下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改 单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GBtr 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 酸性蛋白酶活力单位 在40't:、 pH3.0 条件下， 1 min 水解酷素生成 1 问酶氨酸所需的酶的量，规定为一个酶活力单位。 4 原理 蛋白酶水解酷素产生酶氨酸，在碱性条件下含有酣基的酷氨酸将福林试剂还原生成铝蓝与鸽蓝， 溶液的颜色与酶解产生的酷氨酸的量成正比，而生成的酶氨酸的量与酶的活力成正比，用分光光度计 测定其吸光度值，根据吸光度值计算其酶活力。 5 仪器和设备 5.1 分析天平:感量O.创泪 1 go 5. 2 研钵。 5.3 容量瓶 50 mL、 1∞ mL。 5 .4 电炉:温度可调。 5.5 恒温水浴摇床:温控范围 30't:土0.2't: "'"ω℃土0.2't: 。 5.6 烧杯 200 mL、 250 mL。 5.7 砂芯玻璃滤器:孔径。.45μm。 '5 .8 酸度计:精确至0.01 。 5.9 秒表。 5.10 移液器:精度 10μl。 5.11 分光光度计。 5.12 比色管 25 mL。 6 试剂 方法中所用试剂，除另有规定外均为分析纯试剂，所用水应符合 GBtr 6682-2∞8 三级以上用水 DB13/T 1091-2009 要求。 6.1 浓盐酸。 6.2 磷酸 (85%) 。 6.3 鹊酸锅( Na2WO.. 2H 0)。 2 6.4 钥酸锅( Na2Mo04' 2H 0) 0 2 6.5 硫酸哩。 6.6 浓澳水 (99%)0 6.7 碳酸锅。 6.8 三氯乙酸。 6.9 乳酸( 80%90%)。 6.10 乳酸铺 (70%)。 6.11 酶素。 6.12 L-酷氨酸标准品(含量大于 99.0%) 。 7 溶班 7.1 福林试剂 于 2α)() mL 磨口回流装置中加人鸽酸纳 (Na W0 .2H 0) 1 ∞g、铝酸锅( Na Mo0 . 2H 0) 25 g、 4 2 4 2