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机能实验：影响血液凝固的因素 （此作业得分94分 仅供参考） 一、实验目的 1、学习家兔的基本手术操作。 2、观察血液凝固的现象。 3、了解血液凝固的基本过程。 4、观察某些因素对血液凝固的影响。 二、实验原理 1、血液凝固:血液由流动液体状态变成不流动的胶冻状态，需要多种凝血因子的参与一系列复杂的酶促反应过程。 2、分为凝血酶原激活物的形成、凝血酶原激活生成凝血酶和纤维蛋白原转变为纤维蛋白等三个阶段。 3、分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。 三、实验材料 1、实验对象：家兔。 ? 2、实验器材与药品： 哺乳动物实验手术器械一套，25ml小烧杯2个，竹签，清洁小试管9支，水浴装置一套，冰块，棉花，石蜡油，肝素，草 酸钾，0.025mol/L的CaCl2溶液，肺组织悬液，富血小板血浆，少血小板血浆，生理盐水等。 四、实验方法和观察项目 1、动物手术 将家兔称重后，按5ml/kg的剂量自耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦。 麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上，将颈部被毛用粗剪剪去。 在颈部腹面正中从甲状软骨水平向后至胸骨上缘做5-7cm的纵行切口，一次钝性分离皮下组织、肌肉及气管表面结缔组织直至暴露气管。分离气管，行气管插管术。 分离一侧的颈总动脉，将颈总动脉游离2-3cm，穿双线备用。用其中一线结扎劲总动脉远心端，近心端用动脉夹闭。用眼科剪在颈总动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口（约45°），将动脉插管向心脏方向插入动脉内约1cm，用另一线结扎，已备取血。 2、实验准备 按结果记录表准备好8个试管，并对人员进行分工。 3、取血 打开动脉夹，经颈总动脉插管放血入个试管中，每支试管采血约15ml。注意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件下，所有试管加入血液后都要充分摇匀。 4、理化因素对血液凝固的影响及其结果观察 接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响 观察各试管内血液凝固所所需时间。在每支试管采血完成后开始计时，每隔30s将试管轻轻倾斜1次，观察试管中的血液是否凝固，发现血液呈凝胶状不再流动时停止计时，以此得到各试管血液凝固所需时间。在本实验条件下，超过30min血液未凝可视为“不凝”。 五、实验结果 表 SEQ 表 \* ARABIC 1 不同理化环境中血液凝固的时间 编号 实验条件 凝血所需时间 1 无（对照管） 4’02” 2 加少许棉花 3’10” 3 用液体石蜡润滑试管内表面 8’30” 4 置于冰水混合物中 5’43” 5 置于37℃水浴槽中 3’49” 6 加肝素8U 不凝 7 加2%草酸钾溶液1-2ml 不凝 8 加肺组织液0.1ml 1’49” 六、实验讨论与反思 1、影响血液凝固的因素有哪些，他们影响血液凝固的机制是什么？ 1）血凝加快：棉花作为异物启动内源性凝血途径；肺组织液悬液中的组织因子启动外源性凝血途径；适当升温使酶促反应活性增加； 2）血凝减慢：液态石蜡使试管壁变得光滑，不利于凝血；冰水混合物使酶促反应活性降低；草酸钠与血液中的钙离子反应形成草酸钙沉淀，使促凝血的钙离子被消耗；肝素带强负电荷，使凝血过程受到干扰。 2、三支加入血浆的试管中，第一管与第二管的凝血时间有何差别？第二管和第三管有何差别？ 第二支（棉花）比第一支的凝固时间较短，第三支（石蜡）比第二支的凝血时间明显增长。 关于实验操作： 在兔子耳缘出的多次麻醉造成麻醉剂从其他针孔漏出，麻醉不彻底； 实验器具应提前检查，采血用的玻璃针筒密封性不佳，使实验试管中的血液均多于1毫升且不完全相同，使测量凝血时间受到影响； 实验前分工不甚明确，使解剖过程拖沓，数据记录不准确，没有完成尿道插管。