K210 食品微生物检验技术、K209 农产品微生物检验技术 W7203 API试剂盒法、W7203 API试剂盒法 KJ06 梅里埃工业部Yantai-4.ppt

生物梅里埃工業部 食物致病菌的快速检测 鉴定百分率 %ID ? 细菌鉴定的可能性: 与数据库中各个项的接近程度来确认未知菌是否属于某一个分类单位(科,属,种) 鉴定百分率：ID%图示 典型性参数 T index 待检菌的分类单位被确定以后，T 值表示其生化反应结果与该菌最典型生化谱的接近程度 结果评价 结果判读 每一个鉴定结果都会附有相应的评语 - 鉴定结果的%ID值和T参数 - 鉴定结果的可信性 弯曲菌属 李斯特菌的生化确认 VIDAS李斯特阳性样本确认 鉴定: CAMP 试验 李斯特菌 利用专利(DIM)方法鉴定包括单增李斯特菌等6个条目的李斯特菌 不用进行CAMP试验 API Listeria 由国际参考试验室使用并由美国FDA-BAM 认可方法 API Listeria 7 个发酵反应 2 个酶反应 生化试验 1 DIM 试验 (Differentiation innocua / monocytogenes) API campy: 鉴定弯曲菌的参考方法 第一节 酶反应 apocarps URE NIT EST HIP GGT TTC PyrA ArgA PAL 1个酶反应 à酯酶检测 = EST 4个酶反应à胺基酶检测 = GGT, PyrA, ArgA, AspA 1个酶反应 à 磷酶检测 = PAL 4个生化反应à URE, NIT, TTC, HIP API campy: 鉴定弯曲菌的参考方法 第二节同化及抑制试验 6 个同化反应 à GLU, SUT, ACE, PROP, MLT, CIT 3 个抗生素 à NAL, CFZ, ERO 1 个生化反应 à H2S H2S GLU SUT NAL CFZ ACE PROP MLT CIT 18 条目 VIDAS LMO2:单核细胞增生李斯特氏菌 (* All type of food, except environmental samples) 70mins出结果 25 g 样本 + 225 ml 半 Fraser 肉汤 24-26 h , 30°C ? 1°C 1 ml Fraser肉汤 24-26 h ,30°C ? 1°C 检测 确认 半Fraser 肉汤 or Fraser 肉汤 API Listeria PALCAM平板 OXFORD平板 24h a,37°C ? 1°C 分 离 可 疑 菌 落 TSA 羊血平板 CAMP- 试验 培养 18 小时 37oC 单核细胞增生李斯特氏菌 无害李斯特菌 绵羊李斯特菌 金葡 马红 VIDAS李斯特阳性样本确认 API LISTERIA 试条内容 * 生物梅里埃解決方案 测试种类 显色培养基/ BACTOMETER (i) 食品定量 (细菌总数、大肠菌 群、真菌计数) VIDAS 免疫分析仪 (ii) 定性/筛选 (沙门氏菌、李斯特菌 、弯曲菌 ) API / ATB VITEK (iii)病源菌生化鉴定 (手工、自动、 全自动) 前增菌 打碎 分离及拓增目标 微生物 选择性增菌 後增菌 食品 + 緩沖液 快速检测 分离平板 初步鉴定 血清学试验 快速鉴定 生化鉴定 鉴定所遇的困难 - 分类学复杂及进化 - 涉及很多生化项目 - 工业微生物容易出现变异 - 结果处理及计算麻烦 质控检验需要 - 广范的鉴定范围 - 可靠的结果 - 容易操作 - 快速报告 - 可负担的成本 API系统 - 构成: 试条由特別选择的生化反应小管 API试条有多種类 各有相应的数据库 所有生化结果以同时间一并阅读 API系统 试条由10, 20, 50..…测试组成不等 结果：鉴定百分率 基本单位：条目（Taxa) - 种 (Pseudomonas Aeruginosa) - 生物型号 (E. Coli 1) - 属 (Salmonella Spp.) - 一群菌种 (Aeromonas hydrophilia/cavicie) 所引用的分类学跟国际认可的一样 - International Journal of Systematic Bacteriology 资料库＝整个系统的心脏 生化鉴定 可靠及具创意的选择 系统组成： 容易使用 生化鉴定 生化