生工导论总结.docx

你一定要坚强，即使受过伤，流过泪，也能咬牙走下去。因为，人生，就是你一个人的人生。 你一定要坚强，即使受过伤，流过泪，也能咬牙走下去。因为，人生，就是你一个人的人生。 命运如同手中的掌纹，无论多曲折，终掌握在自己手中 命运如同手中的掌纹，无论多曲折，终掌握在自己手中 第一章绪论 重组DNA(Recombinant DNA)技术(名词解释)：又称为基因 或分子克隆技术，是基因工程的核心技术。是指根据人们的意愿对 不同生物的遗传基因进行切割、 拼接或重新组合，再转入生物体内 产生岀人们所期望的产物， 或创造岀具有新遗传性状的生物类型的 一门技术。 生物柴油(名词解释) 是由动物、植物或微生物油脂与小分子醇类经过酯交换反应而得到 的脂肪酸类物质，可以代替柴油作为柴油发动机的燃料使用。 由于 植物或微生物油脂属于可再生资源， 因此，生物柴油的生产具有重 大意义。 传统能源的日益枯竭需要开发可再生能源 环境保护与汽车工业的发展需要清洁油料 液体燃料的不足已严重威胁到我国的能源与经济安全 生物柴油技术方面存在的问题及解决办法 ? 酶的选择性、寿命与反应时间问题 ? 生物柴油的倾点高、影响低温启动 ? 催化剂的研制 ? 反应的接触界面问题 ? 甘油皂对油品质量的影响 ? 燃烧残留物的微酸性问题 ? 甲醇的聚合问题 ? 残留甲醇与甘油的腐蚀性问题 7.制药应用 开发制造奇特而贵重的新型药品：利用细胞培养技术或转基因 动物来生产蛋白质药物 。 疾病的预防和诊断：单克隆抗体既可用于疾病治疗，又可用 于疾病的诊断。 基因治疗：恶性肿瘤、遗传病、代谢性疾病、传染病等多个 治疗方案正在实施中。 人类基因组计划：人类基因组序列图绘制成功。 干扰灵是一种有效的抗病毒、抗肿瘤的治疗制剂。 乙型肝炎疫苗分为： 乙肝血原疫苗”乙肝基因工程疫苗” 13.能源应用 解决能源危机：生物能源将是最有希望的新能源之一，而其中 又以乙醇最有希望成为新的替代能源。 环境保护：利用这些微生物净化有毒的化合物、降解石油污染、 清除有毒气体和恶臭物质、综合利用废水和废渣、达到净化和 保护环境的目的。 制造工业原料：化工原料如乙醇、丙酮、丁醇等产品；特殊用 途的化工原料，如制造尼龙、香料的原料癸二酸等。 生产贵重金属：利用细菌的浸矿技术对矿石进行提炼金属包括 金、银、铜、铀、锰、钼、锌、钻、镍、钡、铊等 10多种贵 重金属和稀有金属。 第二章基因工程 重组DNA操作一般步骤：(选择题) 获得目的基因； 与克隆载体连接，形成新的重组 DNA分子； 用重组DNA分子转化受体细胞，并能在受体细胞中复制遗传； 对转化子筛选和鉴定； 对获得外源基因的细胞或生物体通过培养，获得所需的遗传 性状或所需要的产物。 获得需要的目的基因常用的方法： 直接从生物体中提取总 DNA，构建基因文库(gene library)， 从中调用目的基因； 以mRNA为模板，反转录合成互补的 DNA片段 利用聚合酶链式反应(PCR)特异性地扩增所需要的目的基 因片段。 4)用化学方法合成 DNA片段 导入宿主细胞将连接有所需要的 DNA的载体导入宿主细 胞的常用方法有四种：①转化，用质粒作载体所常用的方法。 ②转染，用噬菌体 DNA作载体所用的方法③转导，用噬菌体 作载体所用的方法④注射，如果宿主是比较大的动植物细胞 则可以用注射方法把重组 DNA分子导入。 DNA中既可能包括所需要的 DNA片段，不需要的片段和互相 连接起来的载体分子的聚合体。取得所需要的宿主细胞的方 法：①遗传学方法， ②免疫学方法和 分子杂交 方法，分子杂 交、基因文库)。 细胞内总DNA的提取分离与基因文库的构建 细胞内总DNA的提取分离程序 紫外分光光度计测定 DNA溶液的纯度和浓度。 基因文库的构建：将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在 质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库。 反转录人工合成互补 DNA (与上题后半部结合) 构建基因文库获取目的基因存在的问题 费时费事 内含子 序列 反转录人工合成互补 DNA方法的优势：获取的 DNA片段往 往是具有特定功能的目的基因。 聚合酶链式反应(PCR ): PCR技术就是在体外中通过酶促反应 有选择地大量扩增(包括分离)一段目的基因的技术。每一轮聚合 酶链式反应可使目的基因片段增加一倍。 30轮循环可获得2的30 次方乘以(1.07 X 109)个基因片段。 加入4种物质： 作为模板的DNA序列； 与被分离的目的基因两条链各自 5端序列相互补的 DNA引 物(20个左右碱基的短 DNA单链)； TaqDNA聚合酶； dNTP ( dATP, dTTP, dGTP 和 dCTP )。 变性、退火、延伸三步曲 变性：双链 DNA解链成为单链 DNA 退火：部分引物与模板的单链 D