基因工程实验资料.docxVIP

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  • 2020-10-01 发布于天津
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动物细胞提取原理是什么答先用裂解细胞使染色体离析蛋白质变性释放出核酸然后用等体积酚氯仿异戊醇抽提使蛋白质变性沉降到酚与水相的界面则留在水相中离心后在上清液中加入醋酸钠和两倍体积无水乙醇除去多糖物质和沉淀然后离心后沉淀用乙醇洗涤最后用溶解沉淀保存提取中用到了哪些试剂有什么作用二价金属离子螯合剂螯合抑制酶活性因为离子是酶的辅因子种阴离子去污剂在高温条件下能裂解细胞使染色体离析蛋白质变性释放出核酸酚使蛋白质变性氯仿作为除杂剂除去糖脂等杂质加速有机相与液相分离抽提核酸溶液中残留的酚乙丙醇作为消泡剂降低的

动物细胞DNA提取原理是什么? 答:先用SDS裂解细胞,使染色体离析,蛋白质变性,释放出核酸。然后用等体积酚 /氯仿 /异戊醇抽提,使蛋白质变性沉降到酚与水相的界面, DNA则留在水相中,离心后在上清液 中加入醋酸钠和两倍体积无水乙醇,除去多糖物质和沉淀 DNA,然后离心后沉淀用 70%乙 醇洗涤,最后用 ddH2O溶解沉淀DNA , - 20 C保存。 DNA提取中用到了哪些试剂?有什么作用? EDTA:二价金属离子螯合剂,螯合 Mg2+,抑制DNA酶活性。因为 Mg离子是DNA酶的辅 因子。 SDS:—种阴离子去污剂,在高温(55C— 65 C)条件下能裂解细胞,使染色体离析,蛋白 质变性

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