染色13的min然后滴加等量蒸馏水.pptVIP

实验一细胞器的光学显微镜观 察  实验目的 1、观察人、植物活细胞内线粒体和液泡系 的形态、数量与分布 ·2、学习一些细胞器的超活染色技术  实验原理 活体染色:能使生活有机体的细胞或组织特异性着色但对活样品又没 有毒害作用的 色方法,其目的是显示生活细胞内的某些 构,而不影响细胞的生命活动和产生任何物理 变化以致引起细 胞的死亡。活体染色技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生 理、病理状态。 超活染色:体外活体染色又称超活染色,它是由活的动、植物分离出 部分细胞或组织小块,以染料溶液 染料被选择固定在活细胞的 某种结构上而显色 体染料之 固定、堆积在细胞内某些 的部分,主要是靠染料的“电化 性。碱性染料的胶粒表面带阳 离子,酸性染料的胶粒表面带有阴离子,而被染的部分本身也是具 阴离子或阳离子,这样,它们彼此之间就发生了吸引作用。但并非 何染料均可用于活体染色,理论上应选择那些对细胞无毒性或毒性极 碱性料,这可能是为它具有溶解 般说来,最为适用的是 脂质(如卵磷脂、胆固醇等 的特性,易于被细胞吸收。詹纳斯绿B( Janus green B)和中性红 ( neutral red)两种碱性染料是活体染色剂中蕞重要的染料,对于线 粒体和液泡系的染色分别具有专一性  ·生物学实验中使用的染色剂分为酸性、碱性和中性,染色 剂的酸碱性与化学上用H的离子浓度来定义溶液的酸碱性 不同,染色剂的酸碱性与染色剂的显色基团有关,由主要 显色基团是阳离子或是阴离子来确定,若染色剂的主要显 基团是阳离子,为碱性染色剂;若染色剂的主要显色基 团为阴离子,为酸性染色剂;若染色剂的显色基团既有阳 离子也有阴离子则称为中性染色剂(又称复合染料)。有 丝分裂实验用的醋酸洋红和龙胆紫溶液的显色基团均为阳 离子,故都是碱性染色剂,亚甲基蓝、美蓝也是碱性染料: 酸性品红、伊红是酸性染料,苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ弱酸性染料: 对血液进行染色的赖特和吉姆萨是中性染色剂。 ·在细胞的组成中,原生质的碱性部分(如细胞质)容 易与含阴离子的酸性染料发生亲合力而结合:而原生质的 酸性部分(如染色质)容易与含阳离子的碱性染料发生亲 合力而发生作用。而红细胞具有特殊的性质能与中性染色 剂发生亲合力。由此可见细胞成分被染色的强弱与细胞成 分的酸碱性以及染料的性质有关  染色剂溶液的酸碱性 染色剂溶液的酸碱性是指染料溶液的p值,例如醋酸洋红和龙胆紫 溶液均为碱性染 旦它们的溶液却是酸性,而曙红为酸性染料但溶 液是碱性,又如中性红是碱性染料而它的溶液呈中性 染色剂溶液的酸碱性与试剂的成分、反应条件以及染料的溶解度等 因素有关。如斐林试剂需要新配制的Cu(OH2溶液,而双缩脲试剂需 要碱性条件的Cu2+与蛋白质的肽键反应形成紫色或紫红色的络合物。 又如洋红的等电点是pH4.07-4.5,此时洋红的溶解度最 只有在高 已低在套图含栳渡娈曼浮中酯红蒡邊星数速 快, 能够瀕 固核 蛋白 更有利 于 对 染 色 体 的 染色 样用 2% 的醋酽 配制的1%龙胆紫溶液呈酸性,它对根尖分生区细胞内染色剂的染色效 果要好于1%龙胆紫水溶液 由此可见染色剂的酸碱性不是指染色剂溶液的pH值,而是指染色剂 对物质进行染色时与显色有关的主要基团是阳离子还是阴离子  线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的 场所。细胞内氧化磷酸化和形成ATP的主要场所,细胞的 各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提 供的。细胞中线粒体的具体数目取决于细胞的代谢水平 代谢活动越旺盛,线粒体越多。线粒体可占到细胞质体积 的25%。一般真核细胞中含成百上千个线粒体,植物因 十绿体的缘故,线粒体数目相对较少,单细胞鞭毛藻仅 个,酵母细胞具有一个大型分支的线粒体,巨大变形中达 50万个;许多哺乳动物成熟的红细胞中无线粒体。线粒 体的形状多种 般呈线状,也有粒状或短线状。线 粒体的直径一般在0.5~1.0μm,在长度上变化很大 般为1.5~3μm,长的可达10μm,人的成纤维细胞的 线粒体则更长,可达40μm,在胰脏外分泌细胞中可长达 020μm,称巨线粒体。不同组织在不同条件下有时会 出现体积异常膨大的线粒体,称为巨型线粒体 ( megamitochondria)。分布在细胞功能旺盛的区域。詹纳 斯综B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素 氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在 周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。  是透的场题内东伞:要积素籍溶购 代谢产物。液泡膜具有特殊的选择透性,使液泡具有高渗性