环境样品前处理衍生化.pptxVIP

环境样品前处理;;;;;6.1.2 衍生化的条件;6.1.2 衍生化的条件;;;;;;;;;;;;HPLC化学衍生化分类 在线化学衍生化 ★是否与HPLC系统联机 离线化学衍生化 柱前衍生化 ★发生衍生化发应的先后 柱后衍生化;;优点： （1）对用作流动相的溶剂体系没有限制； （2）反应条件，反应速率不受限制； （3）通过选择合适的试剂以及萃取方法，可以 消除许多干扰； （4）过量溶剂、试剂容易除去； （5）转变成合适的衍生物，可使分离度改进。 ;缺点: （1）操作过程繁琐，容易影响定量准确性。 （2）当一个复杂组分样品经过衍生化反应 后，有可能产生多种衍生化产物给色 谱分离带来困难。 ;;;;;;; ;荧光衍生试剂;荧光衍生试剂的基本构成;荧光衍生化试剂亦称荧光探针;1.丹磺酰氯（1-二甲氨基萘-5-磺酰氯） ;2.丹酰肼（1-二甲氨基萘-5-磺酰肼） ;荧光衍生化试剂的分类：;邻苯二甲醛 OPA;（二） 醇、酚的衍生试剂:; （三）羰基化合物的衍生试剂:;（四）羧酸类化合物的衍生试剂:;（四）羧酸类化合物的衍生试剂:;　　　（3）电化学衍生化反应 样品与某些试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物，以便在电化学检测器上有较高的响应。 环境介质对电化学反应有很大影响，如离子强度、pH值和溶剂组成等 。 　　; 　常用的电化学衍生化试剂 ： （1）带硝基的芳香化合物：P141表6-4 （2）芳氨基、酚羟基等　 　;6.2.3 柱后衍生过程; 要求： （1）对流动相的选择更严格，必须考虑衍生化 试剂、反应产物的溶解度，以及它们与流 动相可能发生的副反应； （2）在高效液相色谱中采用高流速，因此 反应速率必须很快（小于30s）； （3）检测器对衍生化试剂不能有响应。 ;柱后衍生流程图;柱后反应器;6.2.4 固相化学衍生化法 ;6.2.4 固相化学衍生化法 ;2. 固定化酶;2. 固定化酶;; 其它衍生化方法：手性衍生化 　用手性试剂与外消旋体???应，在分子内导入另一手性中心，柱前衍生反应生成一对非对映异构体，两者间无镜相关系，物理化学性质不同，可用常规的色谱分离条件进行分离。 ;手性衍生化分离通常基于以下原因： 　 ⑴不宜直接拆分，如游离胺类在手性固定相上往往呈颇弱的色谱性质，生成中性化合物则获得显著改善． 　⑵添加某些基团，以增加色谱系统的对映异构选择性． 　 ⑶提高紫外或荧光检测的效果． 　;6.3 衍生化技术在环境分析中的应用;作业;实验课