植物组培养实验新.pptVIP

植物组织培养 陈勇  培养基的成分及作用 培养基的制备  ■概念:本世纪初开始,以植物生理学为 基础发展起来的一项技术。即应用无菌 操作方法,培养植物的一个离体器官、 组织或细胞 ■这项技术已在快速繁殖、去除病毒、加 速育种进程、次生代谢产物生产和种质 资源的保存等方面取得了巨大的经济效 益、社会效益及生态效益。  根芽形成的激素控制理论 细胞分裂素与生长素的比例与绝对 含量,调控着植物组织的形态发生及细 胞分化,当比值高时产生芽,低时产生 根,比值适中时可能维持原组织生长而 不分化。  物组织培养的优点 研究材料来源单一,无性系遗传背景一致 2.经济方便效率高 3.条件可控误差小 ■4.生长快周期短重复性强 5.周年试验或生产  组织培养的几道主要工序: 培养器皿的清洗;培养基的配置、 分装、包扎和高压灭菌;无菌操作——材 料的表面灭菌和接种;放入培养室培养; 试管苗的种植与初期管理。  作技术 洗涤 培养过程中最经常最大量的工作之一,是洗涤培养 瓶及其它常用器皿。 最常用的洗涤助剂就是家庭用的洗衣粉及肥皂 2.灭菌 有菌的范畴 凡是暴露在空气中的物体,曾经接触过自然水源的 物体,至少它的表面,毫无例外都是有菌的 无菌的范畴 经过高温灼烧或蒸煮过后的物体,经其他物理的 或化学灭菌方法处理过后的物体,是无菌的  常用的灭菌方法可分为物理方法和化学方 法两大类 (1)培养基的灭菌: 常规方法是放入高压灭菌锅内加热加压灭 菌。一般少量的液体只要121C即每平方厘米 1.1kg的压力20分钟就能达到彻底灭菌。 灭菌的功效主要是靠温度,而不是压力。 高压灭菌锅的使用可选用以下任一种: A.打开放气阀,煮沸15分钟后再关闭 B打开放气阀煮沸至大量热蒸汽喷出再关 闭: C先关闭放气阀,待压力上升到0.5kg/cm2 以上时,打开放气阀放出空气,再关闭。  (2)不耐热的物质将采用过滤灭菌 如赤霉素、玉米素、脱落酸、尿素和某些 维生素等。 过滤灭菌的原理:溶液通过滤膜后,细菌 的细胞和孢子等因大于滤膜孔径而被阻。 (3)玻璃器皿及耐热用具等可采用干热灭菌 即利用烘箱加热到160-180℃C的温度来杀 灭微生物 (4)用于无菌操作的器械采用灼烧灭菌 (5)布制品采用高压灭菌 (6)其它  培养基的成分及作用 完善的培养基配方: 包括大量元素、微量元素、铁盐溶 液、碳源、有机附加成分、植物激素、 琼脂等。 配置中注意8个字 大、微、铁、有、糖、琼、激、PH