中药化学技术 黄酮类、黄芩中黄芩苷的提取分离与检识 黄酮类-实训黄芩中黄芩苷的提取分离与检识.pptVIP

黄酮类化合物 实训：黄芩中黄芩苷的提取分离与检识 黄芩是唇形科黄芩属植物黄芩Scutellaria baicalensis Georqi的根。具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效。 主要含有黄酮类化合物，其中黄芩苷是主要有效成分，具有抗菌、消炎作用。 查阅黄芩苷的理化性质。 任务导入 黄芩中的主要成分：黄酮类化合物，黄芩苷（5,6-二羟基-黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷）是黄芩中主要有效成分，含量最高，具抗菌作用，对革兰氏阳性和阴性细菌有抑制作用。 植物体内多以镁盐的形式存在。 《中国药典》规定，黄芩干燥品中含黄酮以黄芩苷计不得少于9.0％。 成分结构与性质 黄芩素 R=H 黄芩苷 R=葡萄糖醛酸 汉黄芩素 R=H 汉黄芩苷 R=葡萄糖醛酸 千层纸素A R=H 千层纸素苷 R=葡萄糖醛酸 黄芩苷 黄芩素（黄色） （绿色） 黄芩苷能被植物体内的酶水解，生成黄芩素。 黄芩素为黄色针状结晶（乙醇），易溶于醇、乙酸乙酯。分子中具有邻三酚羟基结构，性质不稳定，在空气中易被氧化成醌式衍生物而显绿色，这是黄芩在贮藏、炮制不当时变绿的主要原因。在提取分离过程中应注意防止酶解和氧化。 以黄芩为药材，设计其有效成分黄芩苷的提取分离工艺 选择合适的方法对提取产物黄芩苷进行化学和色谱鉴别 实训操作 黄芩苷为淡黄色针晶（甲醇），几乎不溶于水，难溶于甲醇、乙醇、丙酮等大多数有机溶剂，易溶于二甲基甲酰胺、吡啶及碱性溶剂中。 黄芩苷在植物体内多以镁盐的形式存在，故而能用沸水提取。 实训原理 （一）提取与分离 黄芩苷 沉淀（粗品） 滤液 上清液 （水溶性杂质） 滤液 药渣 加10倍量沸水，煎 煮两次，每次1h 黄芩粗粉 沉淀 水洗，50%乙醇洗，在用95%乙醇洗，或重结晶 加HCl调pH1～2，搅拌，80℃保温30min，放冷过夜，滤过 加适量水悬浮，加40%NaOH调pH至7，再加等量95%乙醇，滤过 加HCl调pH1～2，80℃保温 30min，静置，离心沉淀 滤液 残渣 碱溶酸沉法 实训参考 （二）操作注意事项 1．煎煮过程中注意补充失去的水分，调pH不能过低，否则影响收率。 2．保温目的是促进结晶凝聚，便于滤过。 3．黄芩分子中酚羟基易氧化变色，减压真空干燥效果较好。 1. 提取液酸化析出黄芩苷沉淀时，须采取50～80℃保温，目的是便于黄芩苷析出时凝集成大的颗粒，易于沉降和过滤。 2. 用40%氢氧化钠调节pH时，要严格控制pH6.5～7，若pH7时，应用盐酸调回至pH6.5～7，否则，加入乙醇后，即产生大量棕红色胶冻状沉淀物，影响产品的产量和质量。 3. 碱液中加95％乙醇，使含醇量控制在50％左右，可降低水溶性杂质溶解度，与黄芩苷钠盐分离。 黄芩苷的检识 1.与盐酸-镁粉试剂反应：显红色 2.与三氯化铁试剂反应：显绿色 3.与碱液反应：溶于碱水或氨水初显黄色，后变黑棕色。 4.与醋酸铅反应：生成橙红色沉淀。 5.色谱检识 样品溶液：黄芩苷提取物加甲醇制成1mg/ml溶液。 对照溶液：取黄芩苷对照品、黄芩素对照品加甲醇制成每1mg/ml溶液。 固定相：新华层析滤纸（中速，20cm×7cm） 流动相：正丁醇-醋酸-水（12∶3∶5） 显色方法：紫外光（365nm）下样品与对照品在相应的位置上，显相同颜色的斑点。 七、实训注意事项 1．与三氯化铁试剂反应：显绿色 2．溶于碱水或氨水初显黄色，后变黑棕色。 3.遇醋酸铅生成橙红色沉淀 4.色谱检识 样品溶液：黄芩苷提取物的乙醇溶液 固定相：纤维素薄层或纸色谱 流动相：正丁醇-醋酸-水（12:3:5） 显色方法：紫外光观察色斑和荧光 黄芩苷的检识 1．与三氯化铁试剂反应：显绿色 2．溶于碱水或氨水初显黄色，后变黑棕色。 3.遇醋酸铅生成橙红色沉淀 4.色谱检识 样品溶液：黄芩苷提取物的乙醇溶液 固定相：纤维素薄层或纸色谱 流动相：正丁醇-醋酸-水（12:3:5） 显色方法：紫外光观察色斑和荧光 黄芩苷的检识 说明用水提取法从槐米中提取芸香苷的原理及注意事项。 如何才能做到趁热过滤？ 酸水解常用什么酸？为什么用硫酸比用盐酸水解后处理更方便？ 根据实训指导书自选项目进行第二课堂训练 提交书面文件 作业与思考