生物产品分析与检验技术 生物产品的分析方法 生物产品的分析方法.pptVIP

宁夏职业技术学院 宁夏职业技术学院 《生物产品的分析与检验技术》 主讲教师：魏 鹏 1.5 生物产品的分析方法 1.5 生物产品的分析方法 物理分析法：根据物质的一些物理常数（如密度、相对密度、旋光度等）与物质的组成及含量之间的关系来分析； 化学分析法：根据物质的化学性质进行分析，包括滴定分析与重量分析； 仪器分析法：借助一些分析仪器（GC、HPLC等） 将已知浓度的标准溶液滴加到被测溶液中（或将被测溶液滴加到标准溶液中），按化学计量关系定量反应为止，后测体积，根据浓度与体积测定物质的含量。 滴定分析 1.5 生物产品的分析方法 几个概念： 1）化学计量点：液中滴定物质的量与被测物质的量按化学计量定量反应完成； 2）滴定终点：滴定过程中，指示剂发生颜色变化的转变点称为滴定终点； 3）滴定误差：滴定终点与化学计量点不一定刚好符合，由此所造成的分析误差为滴定误差； 4）滴定液指已知准确浓度的溶液，又称标准溶液，可用来滴定被测物质。 1.5 生物产品的分析方法 需注意（适合滴定分析必须具备一定条件）： （1）反应必须按方程式定量地完成，要求在99.9%以上； （2）反应能够迅速地完成； （3）共存物质不干扰主要反应或可用适当的方法消除其干 扰； （4）有比较简便的方法确定化学计量点。 1.5 生物产品的分析方法 滴定分析的误差： A 称量误差 每一份试样的称量至少大于0.1g； B 滴定误差 （1）滴定管、移液管和容量瓶的读数； （2）标准溶液的的浓度应控制在0.01?0.1mol/L,每一份试样消耗标准溶液的总体积应控制在20?30ml之间； C 滴定误差 如指示剂不能准确地在化学计量点时改变颜色。 五、生物产品的分析方法 （二）重量分析法 它根据生成物的质量来确定被测组分含量的方法，先用适当的方法将被测组分与试样中其他组分分离，转化为一定的的称量形式，然后称重，由称得的物质的质量计算该组分的含量。 1.5 生物产品的分析方法 （三）紫外-可见分光光度法 分光光度法按所用的光的波谱区域不同可分为可见分光 光度法(400?780nm)、紫外分光光度法(200?400nm)和红外分 光光度法(3000?30000nm)； 紫外-可见分光光度法是能过利用物质对200?780nm光 谱区域内的电磁辐射具有选择性吸收，对物质进行定性和定 量分析的方法； 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法定量分析的理论依据： 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光垂直射到某一固定 浓度的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚 度的乘积成正比。 Y=Kbc 其中： 1）K为比例常数；2）b为液层厚度； 3）c被测溶液浓度；4）T透光率 1.5 生物产品的分析方法 （四）原子吸收分光光度计 工作原理是将试液喷射成细雾，与燃气混合后进入燃烧的火焰中，被测元素在火焰中转化为原子蒸汽；气态的基态原子吸收从光源发射出的与被测元素吸收波长相同的特征谱线，使该谱线的的强度减弱。后经放大器放大，由显示系统显示吸光度或光谱图。 原子吸收分光光度计 原子吸收分光光度计 原子吸收分光光度计定量分析的理论依据： 基态原子蒸气的吸光度与试液中待测元素的浓度及光程 长度的乘积成正比。 A=K’ cL 其中： 1）K’—与实验条件有关的常数； 2）c——基态原子的蒸气浓度； 3）L——光程长度； 1.5 生物产品的分析方法 （五）气相色谱分析法 气相色谱(GC)是一种把混合物分离成单个组分的实验技术，它常用来对样品组分进行鉴定和定量测定。如果对未知样品的组分全然不知时，可采用气相色谱与红外光谱联用的方法进行测定。气相色谱有很强的分离能力，而质谱、红外光谱可测定未知物的结构。 五、生物产品的分析方法 （六）高效液相色谱法 高效液相法此用了气相色谱的理论，流动相（液体）改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相（HPLC）具有分析速度快、分享效能高、自动化等特点。 高效液相色谱仪 宁夏职业技术学院 宁夏职业技术学院