体外细胞实验方法.pdfVIP

细胞株在适当的培养基中保持 10% FBS。 从 Addgene( 质粒 )购买 HA-FLAG-UCHL3。 #22564 ，然后再克隆到 pGEX-4T-2载体 (Clontech) 中。 UCHL3C94A和 S75A 突变体由位点定向 突变层积产生 ) 。抗 uchl3 抗体购自 ProteinTech 公司 (12384 - 1 - ap) 。抗 ub (P4D1)、抗 rpa32 (9H8) 、抗 brca1 (D9)抗体购自 Santa Cruz Biotechnology 。 抗 rad51 (N1C2)是从 GeneTex 购买的。反 γH2AX(05 - 636),anti-BRCA2(OP95)和 anti-MDC1(05 - 1572) 从微孔被购买。 Anti-BRCA2(推上 a303 国道 - 435 a)和 anti- γH2AX 架 a300 型 (- 081 a)从 Bethyl 购买实验室。抗 53bp1 (NB100-304)购自 Novus Biologicals。Anti-Flag(m2) 、anti-HA anti- β-actin 抗体 购买的 σ。反磷（血清 /thr ）atm/atr 衬底抗体（ 285