纯化水微生物限度检查法验证方案和验证报告.docx

. ******* 有限公司验证文件 纯化水微生物限度检查法验证方案 题目：纯化水微生物限度检查法验证方案 编号： VDP-JY-010-01-1 共 页 第 页 起草： 审核： 批准： 日期： 日期： 日期： 颁发部门： 生效日期： 分发部门：工程设备部、质量部 质量部 专业资料 . 专业资料 . 纯化水微生物限度检查法验证方案 起草、审核、批准： 起草人： 审核人： 批准人： 起草日期： 审核日期： 批准日期： 颁发部门： 分发部门： 质量部 质量部 验证组织： 验证小组名称： 纯化水微生物限度检查法验证方案验证小组 组 长 质量部经理 负责组织、实施 组 员 1 QC 主管 负责验证方案的起草 负责检测数据的复核 负责出具检验报告 2 QA 主管 负责验证方案的确认 负责方法评价 3 微生物限度检验员 负责测试操作和操作原始记录 专业资料 . 目录 验证目的 验证人员职责 参照标准 验证项目内容 评价合格标准 验证试验材料 验证实施计划 菌液制备 供试液制备 计数方法验证 控制菌检查方法验证 验证结论和评价 专业资料 . 纯化水微生物限度检查法验证方案 验证目的： 纯化水微生物限度试验采用薄膜过滤法检查。确认该方法适合于纯化水细菌、霉菌 及酵母菌数测定，控制菌的测定。 ．验证人员职责 2.1 验证领导小组： 2、1 、1 负责验证方案及报告的批准 2、1 、2 组织协调验证工作 2、1 、3 签发验证证书。 2.2.项目验证小组长 2.2.1. 负责验证方案的起草 2.2.2. 负责验证的协调工作，以保证本验证方案的顺利实施。 2.2.3. 负责验证报告的起草。 2.2.4. 负责再验证周期的确认。 2．3. 质量部 2．3.1. 负责验证方案审核 2．3.2. 负责取样及对样品的检验 2．3.3. 负责收集验证记录，并加以分析后，协助项目验证小组长起草验证报告。 2．3.4. 负责验证数据及结果的审核 参照标准： 2010 版中国药典一部附录 XIII 微生物限度检查法。 专业资料 . 验证项目内容： 细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证，控制菌检查方法验证。 评价合格标准 ： 试验组的菌回收率和稀释剂对照组的菌回收率均不得低于70% 。 验证试验材料： 6.1. 被验证产品： 品名 纯化水 取样点：（1）4T/h 纯水系统二级反渗透装置进纯水箱口 ;(2) 4T/h 纯 水系统液体制剂二楼洁具间用水点； (3) 4T/h 纯水系统三楼固体制剂纯水箱总回水口。 检验量 5ml / 次 6.2. 仪器设备： 6.2.1. YX.400A 电热蒸汽压力消毒器 6.2.2 YS －840 净化工作台 6.2.3. 101 型电热干燥箱 6.2.4. SPX-250B 型生化培养箱 6.2.5.PYX-DUS-X 型隔水式电热恒温培养箱 6.2.6 303A-4 型电热培养箱 6.2.7 天平 6.3. 稀释剂： PH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液； 0.9% 的无菌氯化钠溶液 6.4. 验证用培养基 名称 批号 生产厂家 营养琼脂培养基 营养肉汤培养基 专业资料 . 玫瑰红钠琼脂培养基 改良马丁培养基 改良马丁琼脂培养基 6.5. 验证用菌株： 代号 来源 培养时间 验证菌株 培养基 培养温度 （代数） （小时） 大肠埃希菌 营养肉汤 30 — 35 ℃ 金黄色葡萄 营养肉汤 30 — 35 ℃ 球菌 枯草芽孢 营养肉汤 30 — 35 ℃ 杆菌 白色念珠菌 改良马丁培养基 23 — 28 ℃ 改良马丁琼脂 黑曲霉菌 23 — 28 ℃ 培养基 、验证设施计划 序号 项目确认名称 实施负责人 起始和完成日期 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证 验证结果评定、验证周期确认、验 专业资料 . 证报告和发放验证证书 菌液制备 8.1. 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌菌悬液的制备 ①取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜斜面培养物 1 白金耳接种至 10ml 营养肉汤培养基中， 35 ℃培养 18~24 小时。 ②取经 35 ～36 ℃培养 18~24 小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌营 养肉汤新鲜培养物 1ml 加入到 9ml0.9% 无菌氯化钠溶液中， 10 倍稀释至 10 -6 ~10 -7 约 50~100cfu ∕ml 的菌悬液备用。 8.2 白色念珠菌、黑曲霉菌悬液的制备 ①取白色念珠菌的新鲜斜面培养物 1 白金耳接种至 10ml 改良马丁培养基中， 25 ℃培养 24~48 小时。取培养物 1ml ，加入 9% 灭菌生理盐水 9ml ，混匀，10 倍稀释至 10 -5 ~10 -6 细菌数约 50~100cfu ∕ml 的菌悬液备用。 ②接种黑曲霉的新鲜培养物于改