浙江专版2019版高考生物一轮复习第九单元实验专题第30讲微生物的利用教案.pdfVIP

第30讲 微生物的利用 考试标 必考 加试 考试标 必考 加试 1.大肠杆菌的培 2.分离以尿素为氮源 √ √ 养和分离 的微生物 考点一 微生物的培养和分离 1．大肠杆菌 (1)特性：大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧(代谢类型)的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害， 但若进入人的泌尿系统，就会对人体产生危害。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2．细菌的培养和分离 (1)细菌的繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20min分裂一次。 (2)培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中，一般用接种环(工具)转移带 菌的培养物。 (3)细菌分离的方法与特点 分离方法 特点 划线分离法 操作简单 涂布分离法 操作复杂，单菌落更易分开 3.大肠杆菌的培养和分离实验 (1)实验内容：将大肠杆菌扩大培养和划线分离，即用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌，培 养后再在LB固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上就会形成一个个单独的菌落。 (2)实验步骤 培养基灭菌 50mLLB液体培养基和50mLLB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭 菌 倒平板 将培养基分别倒至4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形 成平面 接种 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h 第 1 页 共 19 页 1 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培 划线分离 养基的平板上连续划线，盖好培养皿 培养皿倒置(盖在下面)，放在37℃恒温培养箱中培 12～24h 培养观察 后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落 (3)大肠杆菌分离的用途：单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量 菌株的最简便方法之一。 4．微生物两种常用的接种方法比较 比较 划线分离法 涂布分离法 工具 接种环 玻璃刮刀 通过接种环在琼脂固体培养基表面连 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀 续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释 释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表 原理 分散到培养基表面。在数次划线后培 面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚 养，可以分离到由一个细菌细胞繁殖而 集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞， 来的肉眼可见的细胞群体，即菌落 从而能在培养基表面形成单个的菌落 特点 方法简单，但不适宜计数 单菌落更易分开，但操作复杂些 目的 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落 思考讨论 1．连线无菌技术的方法、类型及对象，并总结消毒与灭菌的区别。 第 2 页 共 19 页 2 消毒和灭菌的区别 项目 条件 结果 常用的方法 仅杀死物体表面或内部一部分对