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面试题（微生物检验部分） 一、简述 聚合酶链式反应简称 PCR的工作原理？ 答： PCR是一种体外 DNA扩增技术，是在模板 DNA、引物和 4 种脱氧核苷酸 存在的条件下， 依赖于 DNA聚合酶 的酶促合反应， 将待扩增的 DNA片段与其两侧 互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的 多次循环， 使 DNA片段在数量上呈指数增加， 从而在短时间内获得我们所需的大 量的特定基因片段。 1、 PCR 由变性 --退火 --延伸三个基本反应步骤构成 2、PCR反应五要素：参加 PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、 dNTP、 模板和 Mg2+ 二、简述革兰氏染色法的原理及其操作步骤？ 答： 革兰氏染色法的原理 G﹢菌：细胞壁厚， 肽聚糖 网状分子形成一种 透性 屏障，当乙醇脱色时，肽聚 糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫 - 碘复合物在 细胞膜 上。呈紫色。 G-菌： 肽聚糖 层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高