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Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 操作手册
目录:
1 系统的组成
系统组成及光路示意图
实物照片说明
2 系统的使用
2.1 开机顺序
2.2 软件的快速使用说明
2.3 显微镜的触摸屏控制
2.4 关机顺序
3 系统的维护
1 系统的组成
激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站
及各相关附件组成。
系统组成及光路示意图:
电脑工作站
激光器
电动荧光显微镜 扫描检测单元
实物照片说明:
电动荧光显微镜
扫描检测单元
CO2 培养系统控制器
激光器
电脑工作站
2 系统的使用
2.1 开机顺序
(1)打开稳压电源(绿色按钮)
等待 2 分钟(电压稳定)后,再开其它开关
(2)主开关 [ MAIN SWITCH ]“ON”
电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“ON”
扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“ON”
(3)打开 [ 电动显微镜开关 ]
打开 [ 荧光灯开关 ]
(注:具有5 档光强调节旋钮)
(4 )Ar 离子激光器主开关 “ON”
顺时针旋转钥匙 至 “—”
预热等待约 15 分钟,
将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby”扳至
“Laser run”状态,即可正常使用
(5)打开 [ 电脑开关 ] ,进入操作系统
注:键盘上也具有 [ 电脑开关 ]
2.2 软件的快速使用说明
(1)电脑开机进入操作系统界面后,双击桌面共聚焦软件ZEN 图标
(2)进入ZEN 界面,弹出对话框:
“Start System”——初始化整个系统,用于激光扫描取图、
分析等。
“Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件,用于已
存图像数据的处理、分析。
(3)软件界面:
1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition )、图像处理(Processing)、维护(Maintain)
(注:Maintain 仅供 Zeiss 专业工程师使用)
2 动作按钮;3 工具组(多维扫描控制);4 工具详细界面;5 状态栏;6 视窗切换按钮;
7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模
块
动作按钮:
Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。
Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1 组图片,如 XYZ 、XYT 等)。
Stop ——暂停/结束扫描。
New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。
激光连接状况检查
眼睛观察/相机/共聚焦 LSM 光路切换(ZEN 软件界面右上角):
Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。)
Camera ——光路切换至相机。
LSM ——共聚焦扫描成像光路。
显微镜设置:
“Ocular”——
“Light Path”——
点击物镜图标,选择物镜——
样品聚焦。
透射光控制(Transmitted Light Control )
反射光光闸控制(Reflected Light Shutter)
荧光激发块选择(Reflector)
共聚焦 LSM 扫描设置
点击“LSM” (ZEN 软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路:
光路设置:
Smart Setup —— 自动预设光路
选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法,
应用“Apply” 。
(注:Fastest 为最快速扫描,多条激光谱线同时扫
描。Best signal 为最佳信号扫描,多条激光谱线顺
序扫描。Best compromise 为兼顾速度与信号的折
中式扫描。)
扫描图像参数设置:
每个通道的精细调节:
包括:
(1)Pinhole 的调节(一般设为 1AU。该值越大,则信号越强,但共聚焦图像效果会降低。
原则上,
在保证图像质量的前提下,该值越接近于 1AU 越好);
(2)Master Gain 的调节(增大则信号和噪音都增强,减小则信号和噪音均减小。原则上,
在保证图
像质量的前提下,Gain 值越小越好);
(3)Digital Offset 的调节(可扣除背景噪音,但标本信号也有一定程度的扣除。原则上,
在保证图
像质量的前提下,Digital Offset 值越接近于 0 越好);
(4 )Digital Gain 的调节(增大则信号和噪音都增强,减小则信
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