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基因工程概述 1.什么是基因工程，基因工程基础步骤？ 基因工程（Genetic engineering）原称遗传工程。从狭义上讲，基因工程是指将一个或多个生物体（供体）基因和载体在体外进行拼接重组，然后转入另一个生物体（受体）内，使之根据大家意愿遗传并表示出新性状。所以，供体、受体和载体称为基因工程三大要素。 1.分离目标基因 2.限制酶切目标基因和载体 3.目标基因和载体DNA在体外连接 4.将重组DNA分子转入适宜宿主细胞,进行扩增培养 5.选择、筛选含目标基因克隆 6.培养、观察目标基因表示 基因工程载体和工具酶 1. 基因工程载体必需满足哪些基础条件？ 含有对受体细胞可转移性或亲和性。 含有和特定受体细胞相适应复制位点或整合位点。 含有多个单一核酸内切酶识别切割位点。 含有适宜筛选标识。 分子量小，拷贝数多。 含有安全性。 2. 质粒载体有什么特征，有哪些关键类型？ 1、自主复制性 2、可扩增性 3、可转移性 4、不相容性 关键类型有1.克隆质粒2.测序质粒3.整合质粒4.穿梭质粒5.探针质粒6.表示质粒 3. 质粒构建 （1）删除无须要 DNA 区域，尽可能缩小质粒分子量，以提升外源 DNA 片段装载量。通常来说，大于20Kb 质粒极难导入受体细胞，而且极不稳定。 （2）灭活一些质粒编码基因，如促进质粒在细菌种间转移 mob 基因，杜绝重组质粒扩