第2节基因工程及其运用.ppt

基因工程培育抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA结合 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 植物组织培养 目的基因只有与运载体结合才能在受体细胞中稳定保存复制并表达 2、基因的针线——DNA连接酶 黏性末端的黏合： 连接位置： 磷酸与脱氧核糖间的化学键 互补的碱基形成氢键连接 黏性末端的连接： DNA连接酶连接缺口 (1)容易进入宿主细胞能在宿主细胞中复制并稳定 保存； (2)具有多种限制酶的切点，便于与不同的目的基因连接； (3)具有某些标记基因，便于筛选成功导入的受体细胞。 运载体的特点 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA结合 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 植物组织培养 目的基因只有与运载体结合才能在受体细胞中稳定保存复制并表达 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 * 基因“嫁接” 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA结合 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 植物组织培养 目的基因只有与运载体结合才能在受体细胞中稳定保存复制并表达 2、基因的针线——DNA连接酶 黏性末端的黏合： 连接位置： 磷酸与脱氧核糖间的化学键 互补的碱基形成氢键连接 黏性末端的连接： DNA连接酶连接缺口 (1)容易进入宿主细胞能在宿主细胞中复制并稳定 保存； (2)具有多种限制酶的切点，便于与不同的目的基因连接； (3)具有某些标记基因，便于筛选成功导入的受体细胞。 运载体的特点 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA结合 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 植物组织培养 目的基因只有与运载体结合才能在受体细胞中稳定保存复制并表达 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 一 基因工程的原理 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 定向改造生物性状 基因重组 （一）基因工程的概念 思考：要把人的胰岛素基因“嫁接”到细菌上，关键步骤是什么？ 关键步骤一：怎样提取合成蚕丝蛋白的基因？ 关键步骤二：怎样将基因运输到细菌体内？ 关键步骤三：怎样将基因与运载体连接起来？ 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 (DNA) （二）基因操作的工具 基因的剪刀——限制性核酸内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶（简称限制酶） 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。 特点： （1）只能识别一种特定的核苷酸序列 （2）只能在特定的位点上切割DNA分子 特异性(专一性) 表：几种常用限制性内切酶及其酶切位点 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 例如： 限制酶 重播 黏性末端 切割位置： 磷酸与脱氧核糖间的化学键 练一练：使用EcoRⅠ切割的结果(识别GAATTC) CGAATTCTAACCGGAATTCGAGCTC GCTTAAGAT