花青苷(花色苷)种类、提取及检测.pdfVIP

花青苷种类、提取及检测 一.种类 花色素均具有类黄酮的基本结构，由两个苯环和一个含氧杂环组成的(C6-C3-C6)C15 化 合物(如图) ，根据B 环羟基化和甲基化位置和数目的不同而将花色素主要分为六类:天竺葵色 素((Pelargonidin)、矢车菊色素((cyanidin)、芍药色素(peonidin)(3 ＇- 甲基矢车菊色素) 、飞燕草 色 素 (delphinidin)、 矮 牵 牛 色 素 (petunidin)(3 ＇ ,5 ＇ - 甲 基 飞 燕 草 色 素)和 锦 葵 色 素 (malvidin)( 3 ＇,5 ＇-二甲基飞燕草色素) 。不同植物中花色素发生糖苷化的位点(C3、C5 和 C7 位等)和数目的差异，及酞化程度的不同使植物中存在着不同的花色素普，其结构复杂，但都 以这六种花色素为基本结构(Grotewold，2006) 。 二.提取 国内外学者对花青苷的提取做了大量研究，提取目的及目标花青苷不同，提取方法略有 差异。花青苷易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶液，花青苷的稳定性受酶、温度、氧气、光、pH 值、金属离子等理化性质的影响，在中性和碱性条件下不稳定。 提取过程常采用酸性溶液，酸能够破坏植物细胞膜并溶解水溶性色素，甲醇溶液提取效 率高于乙醇及水溶液。花青苷一般用于食品着色，考虑到甲醇的不安全因素，一般选用体积 分数为 1%的乙醇溶液。采用盐酸酸化可保持提取液pH 值较低，阻止无酰基花青苷的降解。 随着盐酸被浓缩，pH 值升高，导致花青苷的降解。为获得更接近于天然状态的花青苷，采 用弱有机酸或中性溶剂做初步提取，弱有机酸多用甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸和酒石酸，中 性溶剂一般采用丙酮作提取剂。粗提后的花青苷提取液浓度很低，浓缩时一般不超过 40 ℃， 时间也不宜太长。 1. 2. 花青苷含量的测定：用 0.1% 的盐酸甲醇浸提叶片2 h 后,测 657nm、530nm 处的吸光度。 3. 1 4. 5. 6. 2 7. 8. 9. 3 三.检测 紫外—可见光谱是花青苷结构鉴定的经典方法，其鉴定方法为：①花青苷有 2 个最大吸 收波长,500~540nm 附近及27nm 附近，据此可判定是否为花青苷色素；②若B 环有邻位酚羟 基，则向体积分数 0.01%盐酸- 甲醇溶液中滴加 3~5 滴 AlCl ，甲醇或乙醇溶液时会出现蓝移； 3 ③糖苷位置可据花青苷吸光度比值 A440/Amax 判定；④在波长 300~330nm 间有吸收峰，表明存 在酰基；⑤若在波长 440n 处有肩峰，则 5 号位羟基没被取代；⑥若在紫外光下有荧光，表明 在 5 号位有取代基。（取代基位置参考下图） 4