巨噬细胞功能检测.pdfVIP

单核－巨噬细胞吞噬功能测定 单核－巨噬细胞在机体免疫反应中起着重要作用，因 此，检测单核－巨噬细胞功能对于了解机体的免疫功能状态 具有重要意义。 小鼠巨噬细胞吞噬功能试验（体外法） 1、原理 巨噬细胞具有吞噬异物的功能，将巨噬细胞与被吞噬物 (鸡红细胞、白色念珠菌、白色葡萄球菌等)共同温育，染色， 在油镜下计数吞噬异物的巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指 数，以此判断巨噬细胞的吞噬功能，从而评价机体的免疫状 态。 2、方法 (1)．小鼠巨噬细胞制备 实验前三天每只小鼠腹腔注射 1％可溶性淀粉1 ml。实验时眼球放血、断椎处死小鼠，碘 酒、洒精消毒皮肤，剪开腹部皮肤，暴露腹膜，用镊子夹起 腹膜剪开一小口(注意避开血管)用生理盐水(或 1640)灌注腹 腔，收集腹腔液于试管中(约4 ml)，1500 r/min，离心10 min， 去上清，沉积细胞用生理盐水(或1640)洗二次，离心转速、 时间同上。最后沉积细胞用含10％小牛血清1640 配成适当 1 浓度备用(1~2 ×106 ／ml)。 (2)被吞噬物的制备 1）．鸡红细胞制备 从鸡翼下抽取静脉血，加入5