草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖化酶的实验.pdf

本科学生综合性实验报告 学号 姓名 学院 专业、班级 实验课程名称 枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖 化酶的活性测定 教师及职称 开课学期 2013 至 2014 学年 下 学期 云南师范大学教务处编印 一． 实验设计方案 枯草芽孢杆菌 液体发酵及其产 实验序号 实验三 实验名称 物中糖化酶的活 性测定 实验时间 2013.4.7-2013.4.14 实验室 130 （一）实验目 1. 掌握机械搅拌通风发酵罐的基本结构 (1) 发酵罐主体 (2) 蒸汽灭菌系统：正确把握各阀门的操作 (3) 通气系统 (4) 加热冷却循环系统：各管道联络关系 (5) 搅拌动力系统 (6) 智能控制系统 2. 掌握发酵罐小试的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，参数设 定 3. 掌握发酵过程中的参数测定和在线控制，包括：pH ，DO ，温度，搅拌 速度，生物量，产物生成量，消泡，CO2 。 4. 运用所学发酵工程基本理论分析发酵过程中的实验数据，讨论根霉的发 酵规律。 （二）实验原理及实验流程或装置示意图 1、实验原理 液体发酵的概念 液体发酵技术是现代生物技术之一，它是指在生化反应器中，模仿 自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化 合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基， 灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所 需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。工 业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。工业化 发酵生产必需采用发酵罐，而实验室中发酵培养多采用三角瓶。得到的发 酵液中含有菌体、被菌体分解及未分解的营养成分、菌体产生的代谢产物。 发酵液直接供作药用或供分离提取，也可以作液体菌种。 枯草芽孢杆菌简介 1.1生理特性 枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7～0.8 ×2～3微米， 着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9 × 1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。 菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成 皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在 遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研 究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖。 1.2作用机理 　　1、枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌 素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致 病菌有明显的抑制作用； 　　2、枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益 厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病 菌生长； 　　3、刺激动物免疫器官的生长发育，激活T 、B淋巴细胞，提高免疫球蛋 白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力； 　　4 、枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶 等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用； 5、能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内 干扰素和巨噬细胞的活性。 1.3应用范围 枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应该比较广泛,在污水处理及生物肥发酵或 发酵床制作中应用也相当广泛,是一种多功能的微生物. 　　1、 市