《柱色谱分离实验》.ppt

柱色谱分离实验;了 解： 1. 柱色谱法分离有机物的原理。 2．固定相和流动相的选择原则。 掌 握： 1. 色谱柱的填充方法。 2．柱色谱分离的基本操作。;色 谱 法 简 介;;柱色谱分离示意图;二、实 验 原 理;和;三、实 验 内 容; 吸附剂装填紧密，排除气泡。最终应使吸附剂的上端平整，无凹凸面，无断层。;装柱时应该注意均匀，不能有气泡，裂缝，否则样品可能顺缝隙流动而不吸附，影响样品的分离，应用质软的物体如吸耳球等轻轻敲击柱身，促使吸附剂装填紧密，排除气泡。最终应使吸附剂的上端平整，无凹凸面． ; 样品为液体，可直接加样；样品为固体，可选择合适溶剂溶解为液体再加样。加样时，要沿管壁慢慢加入至柱顶部，勿使样品搅动吸附剂表面。 ;;洗脱时应注意： （1）向柱内加入95%乙醇溶液洗脱（可以通过注射器沿管壁或安装滴液漏斗）在恒压或加压条件下进行洗脱。控制流出速度1滴/秒。逐渐出现色层带分离。 （2）第一色层带到达色谱柱底部时，立即用锥形瓶收集第一色层的溶液，直到其完全被洗出。【注意】洗脱时切勿使溶剂流干！ （3）然后，改用水溶液作为洗脱剂，当第二色层带到达色谱柱底部时，立即收集第二色层的的溶液，直到其完全被洗出。 （4）用量筒分别量取所分离出来的两种溶液的体积后，倒入指定的回收瓶中。 （5）分离结束后，应先让溶剂尽量流干，然后倒置，用吸耳球从活塞 向管内挤压空气，将吸附剂从柱顶挤压出。使用过的吸附剂倒入垃圾桶里。;;; 玻砂防堵塞 装柱需紧密 加压不可大 溶剂勿流干;色谱法在有机化学中的应用: 分离混合物 精制提纯化合物 利用比移值(Rf)鉴定化合物 跟踪反应进程;;柱色谱法分离甲基橙和甲基蓝;实验原理 ;三、实 验 内 容;仪器和试剂;装置图;实验步骤