《白假丝酵母菌》.ppt

白假丝酵母菌;重点 1.白色假丝酵母菌的生物学特性 2.白色假丝酵母菌的微生物学检查; 真菌学概述;真菌的形态特性;单细胞真菌 酵母菌：孢子，无菌丝 类酵母菌：芽生孢子，假菌丝 多细胞真菌 丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝 菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依 据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢 子囊孢子等。;单细胞真菌形态;类酵母菌—白假丝酵母菌;多细胞真菌形态; 真菌菌落特性 1．酵母型菌落： 是单细胞真菌的菌落，形态与细菌 菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如 新生隐球菌。 2. 类酵母型菌落：如白假丝酵母菌，形成假菌丝， 伸入培养基中。 3．霉菌型菌落： 是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮 状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。 ;酵母型菌落;类酵母型菌落; 霉菌型菌落菌;培养特性;变异性抵抗力;致病性与免疫性;真菌感染的病原学诊断;采集标本注意事项：; 检验程序P354;培养检查法 培养基的选择 培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养 真菌的鉴定 生化反应用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。 1.糖(醇)类发酵试验 37℃孵育，观察糖发酵情况。 2.同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养 基(45℃)混合，然后在培养基上分别加糖，置25℃孵育观察 结果。若24h后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈， 否则无生长。 3.同化氮源试验 同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。 4.明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物 5.分解牛乳试验;抗原检测 常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射免疫法。均 应设对照，防止发生假阳性和假阴性。 动物实验 实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究 药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏 明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。 核酸检测 从核酸碱基G+C mol％分析、限制性片段长度多态性(RFLP)、 Southern印迹分析到脉冲场凝胶电泳(PFGE)、PCR指纹、随机 扩增多态性DNA(RAPD)以及DNA特殊片段测序等。 ; 主要致病性真菌;???　深部感染真菌;假丝酵母菌俗称念珠菌，有81个种，其中有11种对人有致病 性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母 菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。 白假丝酵母菌（canidia Albicans）又称白色念 珠菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人 口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机 体中数量少，不引起疾病 。为条件致病性真 菌。;1．微生物特性;营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基 均生长。需氧，室温或37℃，甚至42℃生长良好。菌 落呈酵母样，有大量向下生长的营养假菌丝，表面光 滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落 增大成蜂窝状。在玉米粉吐温-80培养基中可长出厚膜 孢子。;条件致病：;3．微生物检验 1.标本采集：所致疾病不同，取不同标本。2.检验程序P3543.检验方法及鉴定;2）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，25℃或37℃培养1～2d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。 ;3)鉴定试验 芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.2～0.5ml血清中，37℃孵育1.5～４h观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。;厚膜孢子形成试验： 将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25℃孵育1-2d 后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚 膜孢子。 ;糖同化和糖发酵试验： 凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发 酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，25℃孵 育，一般观察2～3d，对不发酵或弱发酵管可延长至10d 或2—4周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混 浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌 和其他假丝酵母菌。;TZC试验： 将白色念珠菌接种于含0.005％氯化三本四氮唑的沙保 培养基中，经22～25℃，24～48h培养，白色念珠菌不 变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红 色(被还原为红色的三苯甲) 。 血清学试验：取病人血清作ELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。 核酸检测：用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。 动物试验 ： ;新型隐球菌; 较大球形，直径可达5～20um， 有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌， 用墨汁阴性显影法镜检 ，可见到透明荚膜包裹着菌细胞， 菌细胞常有出芽，但不生 成假菌丝。 ;在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，