机能试验学：第三章常用实验动物技术.ppt

第三章常用实验动物技术 实验目的 掌握：常用实验动物的捉取、固定与给药方法；实验动物的麻醉方法、气管插管方法、动静脉插管方法、尿管插管方法、输尿管插管方法。 熟悉：颈部和腹部手术操作的基本技术，常用仪器设备与手术器械的使用方法，实验动物取血法和处死的方法。 了解：常用实验动物的主要生物学特性及应用；动物的去毛、编号、去毛、取血和处死方法。 操作练习 全身麻醉 家兔 气管插管 颈总A插管 哺乳动物手术器材清单 金属用品 玻璃/塑料用品 其他 粗剪1把 气管插管1个 纱布 手术剪1把 动脉插管1根 棉签 眼科剪1把 玻璃分针1根 丝线 血管钳4把 三通管1-2个 布条 手术镊1把 注射器2支 压力换能器 手术刀1把 动脉夹1个 药品 戊巴比妥钠（1.5%） 为中效巴比妥类药物。戊巴比妥钠是最常应用的麻醉剂，需保存在阴凉处。一般作用时间可维持2～4 h。使用剂量为30mg/kg，使用方法为静脉注射（iv.）或腹腔注射（ip.）。 生理盐水肝素（1:10000） 肝素是一种酸性黏多糖，主要是由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生。肺·心·肝·肌肉等组织中含量丰富，生理情况下血浆中含量甚微。无论在体内还是体外，肝素的抗凝作用都很强，故临床把它作为抗凝剂广泛使用。 肝素在动物体内抗凝的剂量一般为3～10mg/kg，体外血液抗凝浓度为0.1～0.2mg/ml。 家兔全身麻醉 麻醉剂：1.5%戊巴比妥钠，2ml/kg 给药方法：耳缘静脉注射 麻醉药物应用原则： 依据动物体重计算麻醉药物的剂量； 依据动物生命体征变化控制给药速度； 掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。 针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。 家兔耳缘静脉注射麻醉具体操作 备皮。 用手指轻弹血管，使耳缘静脉充盈。 用左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳缘部分，以左手无名指和小指放在耳下作垫。 右手持注射器使针头由静脉末端呈30°刺入，顺血管方向向心端推进约1-1.5cm 放松左手拇指和食指对血管的压迫，右手试推注射器针芯，若注射阻力较大或出现局部肿胀，说明针头没有刺入静脉，应立即拔出针头，若推注阻力不大，可将药物徐徐注入，注射完毕后将针头抽出，随即以棉球压迫止血。 给药速度 前2/3快速推入，使动物能顺利、快速地渡过兴奋期；后1/3速度宜慢，且边注射边注意观察动物的生命体征变化，当确定已达到麻醉效果时，即停止给药，不必急于将剩余的麻醉药物全部推入。 麻醉成功标志 角膜反射迟钝 肢体肌肉松弛 疼痛反射消失 呼吸变浅变慢 动物实验常用插管技术 气管插管术 颈动脉插管术 颈静脉插管术 插管技术的基本步骤 1. 动物称重、麻醉、固定。 2. 插管部位皮肤去毛、备皮。 3. 皮肤切开。 4. 皮下组织结构的分离。 5. 目标器官或组织结构的游离。 6. 导管的插入或固定。 家兔颈部神经和血管的解剖位置 迷走神经 交感神经 减压神经 气管插管术 1、麻醉固定、颈部皮肤去毛、备皮 2、在颈前区正中作一约5-7cm的切口 3、钝性分离皮下组织、肌肉，游离出气管，穿线备用。 4、在甲状软骨下方第3-4软骨环处作一倒“T”形切口，向胸腔方向插入气管插管，确认插管通畅后用线固定，再在插管分叉处打结（二次固定）。 颈动脉插管技术 1、由颈正中剪开一约5-7cm的口、钝性分离皮下筋膜（略）。 2、换能器与插管的准备。 换能器与三通管、动脉插管连接，充灌满1:10000生理盐水肝素，并关闭三通管。 三通管的使用 3、用玻璃分针分离一侧颈总动脉，暴露血管2-3cm，穿双线备用。 4、结扎颈总动脉远心端，在近心端用动脉夹夹闭。 5、在靠近结扎线处用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小约为动脉口径的1/3~1/2。 6、将充满肝素的动脉插管向近心端插入，用线打双结结扎，再固定于插管缠胶布处（二次固定）。 进入BL－410/420系统。 选择“输入信号”→选择“通道”→“压力”→点击“开始”实验按钮，即可在屏幕上观察到正常的血压曲线。 选择“实验项目” →选择“循环实验” →“兔动脉血压调节”实验模块。 7、打开生物机能实验系统，观察并记录动脉血压。 先小心松开动脉夹，确认无误后再取走。若有渗血或血液回流等意外，可立刻夹闭再进一步处理。 动脉插管注意事项 动脉插管和血压换能器内一定要排净空气； 压力换能器与动物心脏等高； 动脉插管与颈总动脉呈一条直线，方向一致； 掌握好三通管的方向； 结扎固定牢固。