病理检验技术 4.病理组织的脱水 病理组织的脱水—病理组织的透明.pptxVIP

病理检验技术;常规组织病理技术 ;病理组织的透明;一、组织透明目的 一方面，用一种过渡溶剂即能与脱水剂无水乙醇相混溶而置换组织内的脱水剂，又能与熔化的石蜡相混溶,最后又被熔化的石蜡取代。 另一方面，组织经过透明后，组织全部被透明剂所填充，保证组织脱水彻底。;二、透明剂的选择和要求 1.透明剂必须既能与配水剂相混溶，又能与熔化的石蜡相混溶，即在脱水剂无水乙醇和熔化的石蜡之间能起到一种“桥梁作用”。 2.对组织的透明力强，作用快，肉眼上组织的透明度明显。 3.不易使组织收缩硬化和变脆，无毒或毒性低。 4.价钱使宜、容易购买、操作方便。; 三、组织透明的机制 组织在无水乙醇完全脱水后，转入透明剂，组织内的无水乙醇即被抽提出来，完全为透明剂所置换和填充。 透明剂都是一类挥发性的脂溶剂，其折光率多在1.4～1.5之间。因透明剂的折光率与玻璃相近，都在1.5左右，故被其填充的组织在光线透射下呈透明状。; 四、常用透明剂的种类和特性 二甲苯：是目前制作石蜡切片最普遍使用的透明剂。 特性：无色透明液体，有特殊刺激性气味，沸点为144℃，折光率为1.497，易燃烧，长期接触时对黏膜有刺激作用。二甲苯不溶于水，但能与无水乙醇、丙酮混合，又能溶解石蜡和树脂，对组织的透明力强，作用快；缺点如透明时间过长，可使组织变脆，影响切片。以常规制片为例，在室温透明时间(用两级透明剂)，组织透明时间一般以30~60分钟为宜，肾穿等小块组织为15~25分钟。; 四、常用透明剂的种类和特性 甲苯：无色透明液体，有特殊刺激性气味，沸点为110.6℃，折光率1.4967。甲苯的性质似二甲苯，对组织透明较慢，但组织收缩较小，在甲苯内放置稍长时间也不易使组织变硬变脆，但其毒性比二甲苯稍强。 苯：是无色透明液体，具有芳香性气味，沸点为80.1℃，折光率为1.50。苯的性质也如二甲苯，对组织的透明力较强，在蜡缸中蒸发快，对组织的收缩小，不易使组织变硬变脆，但其毒性较大，故不推荐使用 。; 四、常用透明剂的种类和特性 三氯甲烷：俗称氯仿，沸点61～62℃，折光率1.45。有特殊气味，不易燃烧，有麻醉性，长期暴露于日光中易被氧化分解为极毒的光气。三氯甲烷对组织透明作用较弱，所需透明时间为二甲苯的数倍。它对组织的收缩作用很小，透明时间一晚以上，也不易使组织变硬变脆。缺点：不易观察组织的透明状态。优点：三氯甲烷易蒸发，浸蜡时残存于石蜡内的三氯甲烷极易除去；对小动物的脆嫩组织，如用二甲苯透明石蜡包埋后切片出现碎裂难切，可改用三氯甲烷作透明剂。; 四、常用透明剂的种类和特性 TO生物透明剂：由松节油提纯出来的一种二甲苯代替品。无色透明，无毒性，酸价≤0.08，折光率较二甲苯小而比三氯甲烷稍大，能与无水乙醇互溶，能溶解石蜡和中性树胶。优点：无毒性和有透明作用，透明后组织不变硬变脆，切片完整易切。缺点：透明和脱蜡作用都比二甲苯弱，故与二甲苯相比要适当延长透明和脱蜡时间。此外,使用时要注意这些二甲苯代替品对各种染色是否有影响。; 四、注意事项 在定时更换透明剂时，先把二甲苯(Ⅰ)倾去，用吸水纸把盛瓶内擦净，把二甲苯(Ⅱ)倒入二甲苯(Ⅰ)，二甲苯(Ⅱ)盛瓶倾入新液。 组织经无水乙醇完全脱水后转入二甲苯透明，其透明时间因组织的大小、厚薄而不同，一般为30~60分钟，组织小而薄的用时短，组织大而厚的用时长，肉眼观察组织达完全透明后再放置数分钟即可转入熔化的石蜡内进行浸蜡。; 四、注意事项 如组织投入透明剂内达一定时间，仍见组织内有白色混浊状态，表示组织仍存有一定水分，这说明所用无水乙醇已含水，这时，必须把组织从二甲苯取出，放回原来的无水乙醇彻底把二甲苯洗脱(约10～15分钟，并轻轻搅动)，然后转入新换的无水乙醇(Ⅰ)和无水乙醇(Ⅱ)重新脱水后，再转入新换的二甲苯(I)和二甲苯(Ⅱ)再行透明。如用自动脱水机进行脱水和透明浸蜡，这一透明步骤就无法观察，需要靠经验去掌握。 透明剂要注意过滤，以防止组织污染。