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红细胞血型抗体鉴定操作规程 SXYJ-GZ-0216
目的 规范红细胞血型抗体鉴定的操作,发现有临床意义的不规则抗体,确保红细胞血型抗体鉴定的准确性。
适用范围 适用于疑为抗体筛选阳性者,如交叉配血、输血反应和新生儿溶血病等的检测。
职责 检测者负责依据此程序进行红细胞血型抗体鉴定操作。
材料与设备 抗体筛选细胞、混合筛选细胞、谱细胞、IgG抗-D血清、3%RhD阳性红细胞盐水悬液、1%木瓜酶试剂、抗人球蛋白试剂、0.9%无菌生理盐水;一次性使用滴管、试管、玻片;KUBOTA KA-2200型离心机、S648型电热恒温水温箱(37℃)、HH.W21.600型电热恒温水温箱(56℃)等。
操作方法
待检标本的准备及要求
待检标本准备两管血样,一管用EDTA抗凝,另一管不抗凝血清:待检的不抗凝标本应退缩充分,用离心机离心并分离出血清;
细胞:从待检的抗凝标本中吸出一滴红细胞,用0.9%生理盐水充分洗涤三遍,配制成3%红细胞盐水悬液。
盐水介质法
加受检者血清2滴于标好的试管中;
加3%试剂红细胞悬液1滴于每个试管中混合;
离心3400转15秒(KA-2200型离心机Ⅱ档),观察溶血和凝集反应,记录结果;
按需要置4℃、室温(18-25℃)、37℃孵育15-30分钟;
离心观察溶血和凝集,并记录结果,溶血或凝集都是阳性结果。
间接抗人球蛋白法:方法参见SXYJ-GZ-0211。
木瓜酶法:方法参见SXYJ-GZ-0215。
吸收试验:根据初步判断抗体的性质选择相应的方法(参见SXXJ-GZ-0208)。
放散试验:根据初步判断抗体的性质选择相应的方法(参见SXXJ-GZ-0209)。
结果判定 根据凝集强度和溶血现象(方法参见SXYJ-GZ-0202:5.2.1.6),对结果进行判读。根据细胞谱反应格局确定抗体特异性。
注意事项
对所有疑为抗体筛选阳性的样本均进行此项鉴定,常规筛选使用1、2、3号筛选细胞或混合筛选细胞,抗体特异性鉴定使用谱细胞。
判读溶血和凝集的终点必须准确和前后一致,如果溶血和凝集都存在,离心后要立即观察上清液的溶血情况,然后轻轻地把细胞摇散以观察凝集,振摇过度可能将大的凝集块打碎或弱结合的凝集块分散。
判读试验结果时,必须记录观察到的每个细胞样本的凝集强度和溶血现象。同一实验室中的技术人员必须使用同样的解释和符号。
对抗体筛选和特异性鉴定的结果解释参见《全国临床检验操作规程》(第3版):261。
依据 《全国临床检验操作规程》(第3版)中华人民共和国卫生部医政司。
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