生物化学：第三章 蛋白质(3周1-2节) .pdfVIP

第三章主要内容 一．蛋白质概述 二．氨基酸 (重点) 三．多肽（重点） 四．蛋白质的结构（重点） 五．蛋白质结构与功能（重点） 六．蛋白质的性质（重点） 七．蛋白质的分离纯化与鉴定（重点） 要点回顾 • 20种基本氨基酸的结构和侧链性质 • 两性离子 • 等电点 • 紫外吸收特性 • 手性 问题：为什么酸性氨基酸的等电点为两个酸性基团解离常数 的算术平均值？ 依据：等电点时，几乎全部以两性离子的形式存在, 并伴 以极少量、严格相等的正、负离子形式。 二、Amino Acids 9. Separation and analysis (3) Ion-exchange chromatography 分离原理：不同氨基酸在一定pH值下，所带 的净电荷不同，在离子交换柱中移动情况不同 广泛应用 固定相：可与待分离样品进行离子交换的树脂 阳离子和阴离子两种交换方式 磺酸型阳离子交换树脂最为常用 Cation exchange resins commonly used 强酸型聚苯乙烯树脂 弱酸型羧甲基纤维素 弱酸型螯合型聚苯乙烯树脂 Anion exchange resins commonly used 强碱型聚苯乙烯树脂 弱碱型二乙胺基乙基纤维素 磺酸型阳离子交换树脂分离氨基酸（一） 磺酸型阳离子交换树脂分离氨基酸（二） 磺酸型阳离子交换树脂分离氨基酸 例题：一氨基酸混和液，含有Lys, Ala和Glu三种氨基酸，如 何用阳离子交换树脂进行分离？通过合理分析指出氨基酸从树 脂上洗脱出来的先后顺序。 • 上载到阳离子交换树脂上的氨基酸样品液为酸性（pH 2~3 ），然后用pH梯度洗脱。 • 某一pH下，各氨基酸所带正电荷多少不同，被吸附的 强弱程度不同，如：pH = 3时，ΔPLys = +6.74， ΔPAla = +3.02，ΔPGlu = +0.22 吸附强弱：Lys Ala Glu 洗脱先后：Glu Ala Lys 洗脱规律：酸性aa 中性aa 碱性aa 极性相同时，分子量小的aa分子量大的aa 三、Polypeptides 1. Structure of polypeptide 有关概念 • 肽键(peptide bond)，肽(peptides)，二肽 (dipeptides)，多肽(polypeptides)，氨基酸 残基(amino acid residue) 肽键 R1 O R2 R1 O R2 + -H O H C H N C C OH H N C COOH 2 N C N C COOH 2 2 H H H H H H • 氨基酸顺序 多肽链中氨基酸残基排列的顺序 • 氨基端或N-端 多肽链中有游离-氨基的一端 • 羧基端或C-端多肽链中有游离-羧基的一端 • 规定：氨基酸顺序为 N-端(左) C-端(右) • Are Ser-Gly-Tyr-A