细胞生物学翟中和第11章细胞增殖及其调控制.docVIP

生命科学学院10科学四班 谭晓东 第十一章 细胞增殖及其调控制 细胞增殖(cell proliferation)的意义 1、细胞增殖(cell proliferation)是细胞生命活动的重要特征之一,是生物繁育的基础。 2、单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。 3、多细胞生物由一个单细胞(受精卵)分裂发育而来， 细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。 4、成体生物仍然需要细胞增殖，以弥补代谢过程中的细胞损失。 5、机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细胞增殖。 第一节 细胞周期 一、细胞周期 （一）细胞周期概述 1、概念：指从一次细胞分裂结束开始，经过物质积累过程，直到下一次细胞分裂结束所为止，称为一个细胞周期。 2、细胞周期时相组成 1）间期: G1（第一时间间隔期），S（DNA合成期），G2 （第二时间间隔期） 2）M期: 有丝分裂期 3）胞质分裂期(Cytokinesis) 细胞沿着G1→S→G2→M→G1周期性运转，在间期细胞体积增大(生长)，在 M 期细胞 先是核分裂，接着胞质分裂，完成一个细胞周期。 3、根据增殖状况，细胞的类型： ① 周期中细胞：是指在细胞周期中连续运转的细胞，又称为连续分裂细胞或可育细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 ② 静止期细胞：指的是暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，去执行一定的生物学功能，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期的细胞，又称为G0期细胞或休眠细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 ③ 终末分化细胞：指不可逆地脱离细胞周期，丧失分裂能力，分化程度高，保持生理机能活动的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、 多形核细胞等。 4、细胞周期时间 1）不同细胞的细胞周期时间差异很大 2）S+G2+M 的时间变化较小，细胞周期时间长短主要差别在G1期 3）有些分裂增殖的细胞缺乏G1、G2期 （二）、细胞周期中不同时相及其主要事件——CDK激酶调控下进行 1、G1期：与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂等，同时染色质去凝集。晚期有一个检验点（监测外部：外界条件是否符合DNA分裂；内部：DNA分裂有无错） 2、S期：DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构。 3、G2期：DNA复制完成，完成了染色体数目的加倍，即由G1的2n变成了4n，同时，在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子。有G2期检验点 4、M期：M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要包括两种方式，即有丝分裂和减数分裂。遗传物质和细胞内其物质分配给子细胞。 （三）细胞周期长短测定 1、脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法：可测定细胞周期总时间和各时相持续时间 2、流式细胞仪测定法：是一种快速测定和分析流体中细胞或颗粒物各种参数的大型实验仪器，但不能分辨G2和M期，因为DNA均为4N 3、缩时摄像技术：可以得到准确的细胞周期时间及分裂间期和分裂期的准确时间。 （四）细胞周期同步化 1、概念：细胞同步化是指在自然过程中发生的，或经人为处理造成的细胞周期的同步化。 2、类型： 1）自然同步化：自然界存在的细胞周期同步过程，如：动物产下的处于细胞同一时期的卵细胞； 2）人工选择同步化：指人为地将处于不同时期的细胞分离开来，从而获得不同时期的细胞群体 有丝分裂选择法：用于单层贴壁生长细胞，M期细胞与培养皿的附着性低，振荡脱离器壁收集。 — 优点：细胞未经任何药物处理，细胞同步化效率高 。 — 缺点：获得的细胞数量少。 细胞沉降分离法（密度梯度离心法）：根据不同时期的细胞在体积和重量上存在差别进行分离。 — 优点：方法简单省时，效率高，成本低。 — 缺点：对大多数种类的细胞并不适用。 细胞同步化——使细胞同步化在某个特定时期（人工诱导） ①DNA合成阻断法：采用低毒或无毒的DNA合成抑制剂（TdR），特异地抑制DNA的合成，而不影响处于其他时期的细胞进行细胞周期运转，从而将被抑制的细胞抑制在S期的实验方法。 — 优点：是同步化效率高，几乎适合于所有体外培养的细胞系。 — 缺点：是诱导过程可造成细胞非均衡生长 ②分裂中期阻断法：通过抑制微管聚合来抑制细胞分裂器的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期。（秋水仙素、秋水酰胺、nocodazole） — 优点：操作简便，效率高； — 缺点：药物的毒性相对较大 （五）特异的细胞周期 1、定义：指那些特殊的细胞所具有的与标准的细胞周期相比有着鲜明特点的细胞周期。 2、早期胚胎细胞的细胞周期 1）细胞分裂快,无G1期, G2期非常短,S期也短(所有复制子都激活), 以至认为仅含有S期和M期；