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免疫荧光法实验冰冻切片间接法标本正常肝肝癌标本冰冻切片抗体和试剂荧光标记抗体兔抗人端胞浆内一抗羊抗兔二抗小鼠抗人小鼠抗人多抗小鼠抗人单抗羊抗鼠抗工作浓度为用于配制一抗及封闭非特异性结合位点可用正常羊血清封闭非特异性结合位点缓冲甘油封片份磷酸缓冲液与份甘油混合染色步骤冰冻切片室温丙酮冷丙酮固定洗封闭或过夜置切片于湿盒内分别滴加一抗洗分别滴加二抗洗若染核用染色洗缓冲甘油封片荧光显微镜下观察或避光保存
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免疫荧光法实验——冰冻切片
间接法
【标本】正常肝、肝癌标本冰冻切片
【抗体和试剂】
（1） 荧光标记抗体：
兔抗人LAPTM-4B-N端（胞浆内）一抗；羊抗兔
IgG-TRITC二抗；小鼠抗人integrin 6 McAb；小鼠抗人EGFF多抗
（小鼠抗人EGFF单抗）；羊抗鼠IgG-FITb抗（工作浓度为1:30）;
（2）
0.01mol/L pH
7.4 PBS
（3） 2%BSA
用于配制一抗及封闭非特异性结合位点（可用正常羊血清
封闭非特异性结合位点）
（4） 缓冲甘油封片：1份
0.1mol/L pH
8.0磷酸缓冲液与9份甘油混合
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