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实验五 药敏试验 实验目的 掌握药敏试验的操作方法 掌握药敏试验的原理及意义 药敏试验的意义: 1、可预测抗菌治疗的效果,指导临床用药,避免由于用药不当,导致耐药菌株产生或造成人体伤害; “敏感”治疗可能有效; “耐药” 肯定失败; 2、发现或提示细菌耐药机制的存在,帮助临床医生选择合适的药物,避免产生或加重细菌的耐药; 3、监测细菌耐药性,了解细菌的耐药变迁情况,掌握耐药菌感染的流行病学,以控制和预防耐药菌感染的发生和流行; 药敏试验的原理: 将含药纸片贴于已接种待检菌的平板上,药物即向琼脂周围扩散,敏感菌株在含药纸片周围的生长受到抑制,在含药纸片周围可出现抑菌环,环的大小与细菌对药物的敏感程度成正比关系。 药敏试验参照标准 1.行业标准:美国临床和实验室标准协会标准 CLSI:The Clinical and Laboratory Standards Institute 2 培养基: MHA培养基 3 质控菌株:ATCC25922或ATCC35218 4 接种物制备的浊度标准: 0.5麦氏浓度标准或 OD600=0.08~0.13 判定标准 实验材料 大肠杆菌和葡萄球菌肉汤 LB平板 药敏片 镊子 酒精灯 接种环 操作步骤 1、每人取两块平板,接种某种细菌,致密划线 2、用小镊子取药敏纸片贴于培养基上 3、做好标记,置37℃倒置培养,24小时后观察结果 结果观察 抑菌圈直径(mm) 敏感度 20 敏感 15-19 中介 14 耐药 根据抑菌圈大小判断该菌对药物的敏感度 31mm 作业 1、药敏试验的意义是什么? 2、药敏试验操作过程中需要注意哪些问题?
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