用于RT-PCR方法检测新冠病毒试剂盒生产的质控品使用手册.PDFVIP

用于RT-PCR方法检测新冠病毒试剂盒生产的 质控品使用手册 Cat.No.PC012 （质控品A，1×10^6 copies/ml，1ml） Cat.No.PC013 （质控品B，1×10^5 copies/μl，50 μl） Cat.No.PC014 （质控品C，1×10^5 copies/μl，50 μl） 广州复能基因有限公司 广州易锦生物技术有限公司 广州高新技术产业开发区广州科学城 掬泉路3 号广州国际企业孵化器F 区8楼 邮编：510663 电话：4006-020-200 邮箱：sales@ 网址： © 2020 广州复能基因有限公司 1 质控品使用手册 I. 产品介绍 II. 产品组分 III. “模拟病毒”质控品的参考使用流程 IV. RNA 质控品的参考使用流程 V. cDNA 质控品的参考使用流程 VI. “模拟病毒”质控品的检测案例 VII. RNA 质控品的检测案例 VIII. cDNA 质控品的检测案例 I. 产品介绍 “质控品”是指用于核酸检测试剂盒的原料及试剂盒生产过程中质量分析和质量控制的生 物物质，是生产优质检测试剂盒的关键。在试剂盒生产流程中进行严格分析，可以很快的发现 问题，优化反应体系，以提高试剂生产的质和量。 RT-PCR检测样本的包含三个环节，分别是RNA 提取，RT 反应和PCR反应。 质控品A：即模拟病毒质控品，精准定量的模拟病毒颗粒 （A1）或者精准定量的模拟病 毒+人源细胞 （A2），可用于样本采集材料、样本采集、保存、转运和RNA 提取及其后续实 验操作等过程的质量分析和质量控制； 质控品B：即RNA 质控品，由精准定量的质控品A 所提取的RNA （B1）或者精准定量 的质控品A 所提取的RNA+人RNA （B2），通过精准定量后得到的质控品，可用于RT-PCR 中的RT 反应质量分析和质量控制； 质控品C：即DNA 质控品，由精准定量的质控品B通过反转录反应制备的cDNA，可用 于PCR反应体系中扩增效率及荧光信号的质量分析和质量控制。 2 质控品的使用环节 II. 产品组分 货号 产品名称 组分货号 组分 规格 存储 PC012 质控品 A PC012 模拟病毒质控品 1×10^6 copies/ml，1ml -80℃ PC013-01 RNA 质控品 1×10^5 copies/μl，50 μl -80℃ PC013 质控品 B PC013-02 稀释液(1x) 1ml -20℃ 质控品 ， ℃ PC014-01 cDNA 1×10^5 copies/μl 50 μl -20 PC014 质控品 C PC013-02 稀释液(1x) 1ml -20℃ III. “模拟病毒”质控品的参考使用流程 1. 样本处理和核酸提取 ® 建议取 200µl 液态样本进行核酸提取。可使用 RNAzol RT RNA Isolation Reagent （Genecopoeia，Cat.QP020），具体操作步骤请按照说明书分离提取总 RNA 指引进行。 2. RT-qPCR 反应 取出BlazeTaq™Probe One-Step RT-qPCR kit （Genecopoeia，Cat.QP076）试剂盒室温解 冻，短暂离心使管中试剂集中于底部，然后迅速置于冰上保存。根据定量 PCR 仪器需求， 选择是否使用 ROX Reference Dye。按照下表内容，在冰上准备 RT-qPCR 反应液。