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微生物的生长- 生长控制 控制微生物的生长速率或消灭不需要微生物的几种措施 消毒(Disinfection) :利用某些理化方法杀死物体表面或内部所有对人体或动植物有害的病原菌,对被消毒对象基本无害的措施。包括化学消毒剂和巴氏消毒法等。 灭菌 (sterilizatin):采用强烈理化因素,使物体内外包括芽孢在内的所有微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。包括杀菌和溶菌等手段。 化疗(Chemotherapy):即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质,抑制或杀死宿主体内病原微生物,对宿主本身没有或基本没有毒害作用的一种治疗措施。 防腐(Antisepsis):在某些理化因素作用下抑制霉腐微生物的生长繁殖,以防止食品和其他物品等发生霉腐的措施。防腐方法:低温、干燥、缺氧、高渗、防腐剂等。 控制害菌 杀灭 抑制 彻底杀灭: 部分杀灭: 灭菌 杀菌 溶菌 消毒 抑制霉腐微生物:防腐 抑制宿主体内的病原菌:化疗 理化因素对微生物作用的方式 影响理化因子作用效果的因素:理化因子的强度或浓度、 作用时间长短、 微生物种类、 微生物生理状态等。 理化因素控制微生物生长繁殖的方式包括杀菌、溶菌、抑菌。 OD值 活菌计数 一、物理因素对微生物生长的控制 常用的物理因素:加热法、过滤法和辐射法 (一)加热灭菌 当温度超过微生物的最高生长温度时,就会出现致死效应。高温可引起蛋白质、核酸和脂肪等重要生物大分子降解或改变其空间结构等,从而使其功能丧失。 (1)干热灭菌(dry heat sterilization) 烘箱内热空气灭菌 干热灭菌 160℃,3h;170℃,2h; 适用于金属和玻璃器皿; 石蜡油和粉料物质。 接种针、接种环和试管口 火焰灼烧 2. 加热杀菌的方法 (2)湿热灭菌(moist heat sterilzation) 利用热蒸汽灭菌的方法。在相同温度下,比干热灭菌更有效。 ①湿热蒸汽穿透力强; ②能快速破坏维持核酸和蛋白质空间结构中化学键的稳定性; ③蒸汽凝结放出大量的汽化潜热能迅速杀灭物体上的微生物。 原因 多数细菌和真菌的营养细胞:60℃处理5-10分钟; 酵母菌和真菌的孢子:80℃以上处理; 细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上。 湿热灭菌的条件: 常用的湿热灭菌方法: 适用于牛奶、啤酒、果酒和饮料等液态食品 低温维持(LTH)法 : 63 ℃ ,30min 高温瞬时(HTST)法: 72 ℃ ,15s 目前一般都采用超高温灭菌法: 135~150℃,2~6s 1)常压法 ① 巴氏消毒法(Pasteurization) 用较低的温度处理不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料,以杀灭其中的无芽孢病原菌,又不影响其原有风味的消毒方法。 巴氏消毒条件: ③ 间歇灭菌法(fractional sterilization or tyndallization) 分段灭菌法,适用于不耐热培养基(如含硫培养基)。 80~100 ℃ 下蒸煮30~60min,然后在37℃ 下保温过夜,如此重复2~3次。 ② 煮沸消毒法 采用在100℃下煮沸数分钟的方法,可杀死细菌的营养细胞和部分芽孢,一般用于饮用水的消毒。 135~140℃,5~15s 能减少营养成分的破坏 2)加压法 ① 常规高压蒸汽灭菌法(autoclaving):全部杀灭 利用提高压力使水的沸点升高,以提高水蒸气的温度,从而有效地杀灭微生物。 0.1MPa(121℃) 15~30min 适用于各种耐热耐湿物品的灭菌,如一般培养基、生理盐水等各种溶液、工作服及实验器材等。 ② 连续加压蒸汽灭菌法(continuous autoclaving),(连消法) 用于大规模发酵工厂的大批量培养基的灭菌。让培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却。一般加热至135~140℃下维持5~15s。 优点: 灭菌彻底,营养破坏少,原料利用率高。 灭菌时间短,蒸汽负荷均衡,锅炉利用率高,易于自动化操作。 3、高温对培养基成分的有害影响及其防止 (1)有害影响 ① 形成沉淀物。有机物沉淀如多肽类,无机物如磷酸盐
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