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- 2020-11-14 发布于山东
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课题 3 血红蛋白的提取和分离
【学习目标 】
1、简述蛋白质提取和分离的基本原理
2、理解蛋白质提取与分离的实验操作过程
【重点与难点 】
重点:蛋白质提取和分离的基本原理
难点:蛋白质提取与分离的实验操作(凝胶色谱操作)过程
【知识链接 】
血红蛋白存在于何种细胞?其特性和作用分别是什么?
为何不选用鸡血做实验材料?
分离不同种类蛋白质的依据是什么?
【自主学习内容一】基础知识(记忆)
1.凝胶色谱法:
凝胶色谱法也称做
,是根据
分离蛋
白质的有效方法。凝胶实际上是一些由
构成的多孔球体,在小球体内部有
许多贯穿的通道, 相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时的速度不同,
相对分子质量较小
的蛋白质由于能够
路程较
,移动速度
;而相对分子质量较大
的的蛋白质
,只能在
移动,路程
,移动速度
。
2.缓冲液
缓冲液通常是由 1~2 种缓冲剂(如
NaHCO3、( NH4)2SO4)溶解于水中配制
而成;其作用是
。
3.电泳: 电泳是指
电泳利用了待分离样品中各
分子
以及
,使带电分子产生不同的
,从而
实现样品中各种分子的分离。两种常用的电泳方法是
和
。
在测定蛋白质分子量时通常使用
,其中 SDS的作
用是
,
。蛋白质在聚丙烯酰胺
凝胶电泳中的迁移率取决于它
以及
等因素。
【自主学习内容二】实验操作(
凝胶色谱法 )
1. 蛋白质的提取和分离
一般分
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