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江西省信丰中学高二生物导学案（生物选修一） 2.1_ 微生物的实验室培养导学案 【学习目标】 了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。 【学习过程】 【课前自主学习】 （一）培养基 1. 按照配置成的状态 , 培养基的种类包括 培养基和 培养基等。 2. 培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四类营养成分。 3. 在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、 _ 以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添 加 ；培养霉菌时需要将培养基的 PH调至 ；培养细菌时需要将培养基的 PH调至 ；培养厌氧微生物时需要提供 ________的条件。 （二）无菌技术 1. 获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容： ①对实验操作的 、操作者的衣着和手进行清洁和 。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 ____________________ 附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 _______________________ 相接触。 消毒和灭菌 1）消毒是指使用 ____________________________________ 仅杀死物体表面或 _________的 部分微生物（不包括 ______和 _______）。常用的消毒方法有 、 。此 外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用 、 等。此外，实验室里还用 进行消毒。 （ 2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体 __________ 的微生物，包括芽孢和孢子。常用的 灭菌方法有 、 、 ， 二、实验操作： 1. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 → → → →倒平板 , 往往在灭菌前还需 要_____________ 2. 纯化大肠杆菌 微生物接种的方法中最常用的是 和 。 （ 1）平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表面 ____________的操作，将聚集的菌种 ______________到培养基的表面。 稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的__________ ，然后将不同 ________的菌液分别涂 布在琼脂固体培养基的表面 , 进行培养。在稀释度 的菌液时，聚集在一起的微 生物将被分散成 _________________ ，从而能在培养基表面形成单个的 ________，它在 生态学上属于什么单位？ _______________. 三、结果分析与评价 如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色形状大小基本一致，说明接种符合要求。 若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_____________未达到要求。 3.__________________( 作为对照的培养基 ) ，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基 ___________ 不彻底，实验失败。 四、菌种的保存 1. 对于频繁使用的菌种，我们可以采用  法；利用固体斜面培养基培养后，保  存 江西省信丰中学高二生物导学案（生物选修一） 在 4℃冰箱中，每 3～ 6 个月转种培养一次，缺点 _________________________ 。 2. 对于需要长期保存的菌种，可以采用 法；温度为 _______。 【课堂探究、合作、展示】 探究一：消毒与灭菌 1、无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？ 2、利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？ 3、在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ 4、溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 探究二：有关“倒平板”操作 培养基灭菌后，需要冷却到500C 左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？ 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 探究三：有关“平板划线法”操作 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 在作第二次以及其后的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 探究四：有关“稀释涂布平板法”操作 1、 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求， 想 一想，涂布平板操作的第 2 步应如何进行无菌操作？ 2、培养 12h 和 24h 后的菌落大小？菌落分布位置？原因？ 3、在某培养基上出现了 3 种特征不同的菌落是什么原因？ 【课堂检测】 1. 下列措施中不属于消毒的是（  ） A. 酒精擦拭双手  江西省信丰中学高二生物