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2019年检验技士精选体验课
四、血液涂片制备 一张良好的血片
厚薄适宜
头体尾明显
细胞分布均匀
血膜边缘整齐
并留有一定空隙
25。?30
25。?30。夹角
血滴大小、推片与载玻片间夹角、推片速度、血细胞比容。
血涂片的制备
手工推片法
厚血膜涂片法 疟原虫、微丝蚴 等。
新鲜血克谪
截璇片中央
推片徐棟1 R同形血鷹 竝向外卸a
自然干燥描加蒸再干后染色直社
五、血液细胞染色 瑞氏染色法
染料组成
染料组成
酸性染料伊红(E-)钠盐 阴离子
碱性染料亚甲蓝(M +)氯盐 阳离子 将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中。
甲醇的作用:一是溶解亚甲蓝和伊红;二是固定细胞形态。
染色原理 物理吸附与化学亲和作用
俪性物ft
釀如1
冊、瞬性範粒 —._ ___—-
〉+例I
②醸性切胃
睛酿性物质
—红色:-
莊甲蓝紫蓝色或蓝色
中性颗粒 呈等电状态与E-和M+结合t淡紫红色
红细胞
原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质, 染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
pH值的影响
细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液 pH而定,在偏酸性环境中正
电荷增多,易与伊红结合,红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红,细胞核呈淡蓝色或不染色;在偏碱性环境中 负电荷增多,易与美蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,嗜酸性颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗 粒偏粗,呈紫黑色。
pH v pI t Pr带正电荷多t易与 E-结合t染色偏红
pH pl t Pr带负电荷多t易与 M+结合t染色偏蓝
磷酸盐缓冲液(pH6.4?6.8 )
保证细胞受色时恒定最佳 pH条件
注意事项
血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱 色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。
染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用 甲醇脱色。
六、方法学评价
血涂片制备
用血量少、操作简单,是应用最广泛的方法。 疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。
血液细胞染色
瑞氏染色法:最经典、最常用。对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果,但对细胞核的 着色能力略差。
吉姆萨染色法:对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好,结构更清晰,但对细胞质成分的着色能 力略差。
瑞-吉姆萨复合染色:使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。
瑞氏染料的质量规格用吸光度比值( rA )来评价。
新配制染料rA接近2,降到(1.3 ± 0.1 )染料即可使用。
新鲜配制的染料偏碱, 须在室温或是37 C下贮存一定时间, 待亚甲蓝逐渐变为天青 B,贮存时间愈久, 染色效果愈好。在贮存过程中,必须加塞,以防甲醇挥发和氧化成甲酸。所用甲醇须为 AR级,若其中含过
多丙酮,会使染色偏酸,白细胞着色不良。
七、质量控制
血涂片制备
血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚,反之则愈薄。
血细胞比容增高、血液黏度较高时,采用小血滴、小角度、慢推;血细胞比容减低、血液较稀时,应 采用大血滴、大角度、快推。
血液细胞染色
染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、 pH值密切相关。
血清与血浆的区别是
血清缺少某些凝血因子
血浆缺少某些凝血因子
血清缺少凝血酶
血浆缺少凝血酶
血清缺少纤维蛋白
『正确答案』 A
『答案解析』血清与血浆的差别是:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子i(纤维蛋白原)、n(凝血 酶原)、V、忸等。
婴幼儿做血常规检查时,多使用的采血部位是
颈外静脉
耳垂毛细血管
足跟毛细血管
肘部静脉
以上都是
『正确答案』C
『答案解析』手指采血操作方便,检查结果比较恒定,世界卫生组织( WHO )推荐采集左手无名指指端
内侧血液,婴幼儿可采集大踇趾或足跟内外侧缘血液,严重烧伤患者,可选择皮肤完整处采血。
下列说法错误的是
采血前要仔细检查针头是否安装牢固
采血前要仔细检查针筒内是否有空气和水分
使针头与皮肤成30 °角斜行快速刺入皮肤
抽血时针栓可以外抽和内推
取下注射器针头,将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中
『正确答案』D
答案解析』抽血时只能外抽,不能内推。
导致溶血的因素不包括
抽血速度太快
血液注入容器时未取下针头
注入抗凝管后剧烈振荡混匀
注射器干燥
取血后直接放入4 C冰箱
『正确答案』 D
『答案解析』注射器中有水会导致溶血,干燥不会。
血液标本4C保存,可使血液分析仪
红细胞计数结果减低
红细胞分布宽度增加
血小板计数结果增加
血小板计数结果减低
白细胞计数结果减低
『正确答案』 D
『答案解析』血浆在 4 C保
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