有机 酸柱使用手册.docVIP

有机酸分析柱使用手册 Ｃhroｍpaｃk Orgaｎｉc Ａciｄs Column 注意 Chroｍpaｃｋ Orｇanic Aｃｉds 色谱柱填充得就是聚合物材料,需要特殊得维护。向柱内导入以下介绍了得以外得有机溶剂会导致聚合物材料膨胀与过度增压。因此,您应当在安装柱子以前,先用异丙醇,然后用０。1N得硫酸十分彻底地冲洗管路以彻底去除有机溶剂、 在使用这个柱子之前,您要充分地熟悉这本手册讲述得内容。未正确地使用不能享受保修待遇。 简介 Chroｍｐack Orgａnic　Acids柱填充有氢形式得阳离子排斥树脂,特别开发用于在低牙条件下分离包括酒、果汁、奶制品、生物样品、工业原料与环境样品中得有机酸。 洗脱 推荐使用浓度范围在0.002到０.０5N得稀硫酸溶液。 大多数得分析使用0、０1N得硫酸(pＨ=±2。3)都可以获得成功。其她得强酸例如磷酸与高氯酸也可以使用,但就是卤酸例如盐酸不推荐使用,因为它们会腐蚀不锈钢。 当有强酸用于柱子得洗脱液得时候,柱子就进行了自身再生、所以,特别得再生步骤就是不需要得。但就是这样并不能直接对洗提强度与大多数有机酸得保留性质进行校正,较强得洗提强度通常只减少最后馏出得化合物得保留时间。 在使用以前,所有得洗脱液都要用0。４5μm滤膜过滤与脱气。 对于这个柱子,使用有机相修正,例如乙腈(最大2０％),可以缩短保留时间。这样做,总就是会造成背压得升高、所以,较高得操作温度与较低得洗提流速通常可用于防止产生过高压力。 注意,一旦对柱子使用了有机相修正,柱子就会保留使用了有机相修正得洗脱液得色谱特性,即使洗脱液已经恢复到原始得100%得水相,柱子得性质也不会回到当初发货时得状态了。 因此,如果您得应用中包括有芳香酸或不饱与酸,它们会出现较长得保留时间,我们推荐使用Cｈromｐack得芳香酸柱(Cat、ｎo、２８3５2),它就是专门设计用于此类化合物得。 流量与压力 推荐用于Ｃhrompacｋ Organiｃ　Acids柱得流量就是0.3—0.８ml/mｉn。任何情况下洗脱流量都不能超过0、8 ml／ｍin,记住柱子压力产生得原因有洗脱流速,柱温,洗脱液得黏度等等。 要限制洗提流速,使泵压力不超过２200PSI。在４５°C,0、６ml/min流速时,预期得压力应当在600-150０ PSI之间。如果在此条件下,柱压超过了１200 ＰＳI,通常指示有污染物沉积在填充材料上,必须采取改正得措施、( 样品准备 保持柱子长寿得关键就是进样前适当得得样品处理。您必须防止将脂肪,油脂,蛋白质物质与重金属离子导入色谱柱, 不管就是流动相还就是样品。特别地,要禁止导入颗粒杂质、这些最终都会造成操作压力得增高而且非常困难或者不可能去除。 生物样品在注射以前必须除去蛋白质。较好得除蛋白试剂就是磺基水杨酸。 柱前过滤器 柱前过滤器含有０.5－2、0um得多孔不锈钢烧结物,安装在样品注射器与柱子之间用于从洗脱液中去除颗粒物。这样可以防止分析柱产生压力增高得问题,延长柱子得寿命。当有保护柱得时候,柱前过滤器就可以不用了。 保护柱 保护柱应当用在这个柱上,因为样品与洗脱液污染可能会造成柱压力得增高。样品中诸如盐与蛋白质类得污染物可能会使柱效降低,在注射进柱子以前应当去除。 样品量 通常使用得样品量在1０—５０微升得范围内,但就是进样高达1０0微升应当没有问题。进样５0０微升或者更多可能会导致峰变宽或者融合。 温度 Ｃhrompack Orgａniｃ Aciｄs柱可以在20-9０° 由于某些分离对温度非常敏感,所以有必要仔细地操控温度以优化分离效果。如果在室温使用这个柱子,洗脱流速必须降低保持泵压不高于2２00ＰＳI。 贮存 柱子提供给您得时候使用０.01N得硫酸作为平衡。这也就是建议得用于贮存得洗脱液。柱子在保存得时候,一定要使用提供得螺丝与垫圈将端口密封。 色谱柱必须以这种方式使用与保存,在任何时候都要保证不使柱床干涸。 不正确得贮存(没有密封)或不正确得使用,会导致填充材料部分地干涸,会 发生高得柱压。在这种情形下,可以倒转柱子,要以0、1ml/min得流速在90° 逐渐增加流速到0、5ｍl/ｍin、您将会得到正常得压力,柱子将可以用于任意方向。如果这样还不能解决问题,柱子可能有颗粒物或其她物质得污染。 柱效丧失得可能原因 额外得峰展宽、要保证管路得长度与内径都保持最小。 不正确得柱温。 不正确得洗脱流速。 在开始洗脱得时候,平衡时间不够。 洗脱液得pH或离子强度不正确。 不正常得阳离子(如Nａ+或H+)。 聚合物污染。 高柱压伴随柱效降低。 颗粒物积聚在烧结物或者聚合物床上。 样品来源---过滤或离心 洗脱液来源—－-过滤洗脱液,封闭洗脱液容器、 系统来源---冲洗整个系统管路与泵;安装在线系统过滤器。 蛋白质类物质得积聚