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分子遗传图谱构建
第三章分子图谱的构建
分子图谱构建的步骤:
选择适合作图的DNA标记;
2.根据遗传材料之间的DNA多态性,选择用
于建立作图群体的亲本组合;
3.建立具有大量DNA标记处于分离状态的分
离群体或衍生系;
4.测定作图群体中不同个体或株系的标记基
因型;
5.对标记基因型数据进行连锁分析,构建标
记连锁图。
第一节作图群体的建立
要构建DNA标记连锁图谱,必须建立作图群
体。建立作图群体需要考虑的重要因素包
括亲本的选配、分离群体类型的选择及群
体大小的确定等
亲本的选配
①首先要考虑亲本间的DNA多态性
②选择亲本时应尽量选用纯度高的材料,并
进一步通过自交进行纯化。
③要考虑杂交后代的可育性。
④选配亲本时还应对亲本及其F1杂种进行细
胞学鉴定。
二、分离群体类型的选择
根据其遗传稳定性可将分离群体分成两大类
·一类称为暂时性分离群体,如F2、F3、F4、BC
三交群体等,这类群体中分离单位是个体,一经
自交或近交其遗传组成就会发生变化,无法永久
使用。
·另一类称为永久性分离群体,如R、DH群体等,
这类群体中分离单位是株系,不同株系之间存在
基因型的差异,而株系内个体间的基因型是相同
且纯合的,是自交不分离的。这类群体可通过自
交或近交繁殖后代,而不会改变群体的遗传组成,
可以永久使用。
(一)F2代群体
优点:
a)自花授粉植物,还是异花授粉植物,建立F2群
体都是容易的
缺点
a)存在杂合基因型。对于显性标记,将无法识别
显性纯合基因型和杂合基因型
b)由于这种基因型信息简并现象的存在,会降低
作图的精度。
C)为了提高精度,减小误差,则必须使用较大的
群体,从而会增加DNA标记分析的费用。
d)不易长期保存,有性繁殖一代后,群体的遗传
结构就会发生变化。
(二)Bc1群体
优点
a)Bc1群体中每一分离的基因座只有两种基因型,
它直接反映了F1代配子的分离比例。
b)可以用来检验雌、雄配子在基因间的重组率上
是否存在差异。
缺点
a)不能长期保存。
b)对于一些人工杂交比较困难的植物,BC1群体
也不太合适,因为一是难以建立较大的BC1群
体,二是容易出现假杂种,造成作图的误差
(三)R群体
R(重组自交系)群体是杂种后代经过多代
自交而产生的一种作图群体,通常从F2代
开始,采用单粒传的方法来建立。
优点:可以长期使用,可以进行重复试验。
缺点:
a)构建R|群体要花费很长时间
b)异花授粉植物由于存在自交衰退和不结实
现象,建立R群体也比较困难。
(四)DH群体
高等植物的单倍体( Haploid)是含有配子染色体
数的个体。单倍体经过染色体加倍形成的二倍体
称为加倍单倍体或双单倍体(DH)。
优点:
a)DH植株是纯合的,自交后即产生纯系,因此DH
群体可以稳定繁殖,长期使用,是一种永久性群
体
b)DH群体的遗传结构直接反映了F1配子中基因的
分离和重组,因此DH群体与BC1群体一样,作
图效率是最高的
C)DH群体跟R|群体一样,可以反复使用,重复试
验,因此也特别适合于QTL定位的研究。
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