液相色谱法2讲课稿.pptVIP

液相色谱法2;特点： 灵敏度高 对温度和流速不敏感，可梯度淋洗 结构简单 ;2荧光检测器;;卤化钨灯发出连续波长的强激发光，280nm 透镜 激发滤光片 流通池 与激发光成90度的荧光聚焦 发射滤光片 光电倍增管 ;差示折光检测器;;如果工作池和参比池都通过纯流动相，光束无偏转，左右两个光电管的信号相等。此时输出平衡信号。 如果工作池有试样通过，由于折射率改变，造成了光束的偏移，从而使到达棱镜的光束偏离棱口，左右两个光电管接收的的信号不等，因此输出一个代表偏转角大小，或试样浓度的信号而被检测。;当介质中的成分发生变化时，其折射随之发生变化，如入射角不变，则光束的偏转角是介质中成分变化的函数。因此，利用测量折射角偏转值的大小，便可以测定试样的浓度。;电导检测器;;高效液相色谱法的主要类型及分离原理;1液液分配色谱法;K=cs/cm=k Vs/Vm K-分配系数 Cs-溶质在固定相中的浓度 Cm-溶质在流动相中的浓度 k –容量因子 Vs-溶质在固定相中的体积 Vm-溶质在流动相中的体积;分离的顺序取决于分配系数的大小 分配系数大的保留值大 ;2液-固色谱法;K=[Xa][Sm]n/[Xm][Sa]n K为吸附平衡系数 液固色谱适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有不同官能团的化合物和异构体有较高的选择性。;3离子交换色谱法;4离子对色谱法;待分离的有机离子X+ 在流动相或