滤膜法测定总大肠菌群讲解学习.docxVIP

滤膜法测定总大肠菌 滤膜法测定总大肠菌群 1主题内容与适用范围 本方法规定了生活饮用水中总大肠菌群的滤膜测定方法。 本方法适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定。 2方法提要 用孔径为0.45卩谥勺微孔滤膜过滤水样，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴在选 择性培养基上，经培养后，计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。 3培养基与试剂 3.1品红亚硫酸钠培养基 3.1.1成份 A蛋白胨10g B酵母浸膏5g C牛肉膏5g D乳糖10g E 琼脂 15~20g F硫酸氢二钾3.5g G无水亚硫酸钠5g左右 H碱性品红乙醇溶液（50g/L） 20mL I蒸馏水1000mL 3.1.2储存培养基的制备 先将琼脂加到500mL蒸馏水中，煮沸溶解，于另500mL蒸馏水中加入硫酸 氢二钾、蛋白胨、酵母浸膏和牛肉膏，加热溶解，倒入已溶解的琼脂，补充蒸 馏水至1000mL,混匀后调pH为7.2~7.4,再加入乳糖，分装，115C高压灭菌 20min，储存于冷暗处备用。 3.1.3平皿培养基的配制 将上法制备的储存培养基加热融化，用灭菌吸管按比例吸取一定量的 5%碱 性品红乙醇溶液置于灭菌空试管中，再按比例称取所需的无水硫酸钠置于另一 灭菌试管中，加灭菌水少许，使其溶解后，置沸水浴中煮沸 10min以灭菌。 用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液，滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色 退成淡粉色为止，将