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生物质谱 Conventional mass spectrometers used for low volatile molecular weight samples that are introduced in the vapor phase are called single- focusing mass spectrometers. 20世纪60年代 质谱技术在有机化合物小分子的结构测定中得到应用，而对于大分子(分子量超过1000Da)、极性分子和难气化的分子，则显得无能为力。 70年代 Macfarlane等人发明了一种被称作等离子体解吸(Plasma desorption, PD)的离子化技术，使得质谱测定分子量范围扩大到几千道尔顿。 80年代初 Barber等人又引入了快原子轰击(fast atom bombardment，简称FAB)电离技术，并成功地测定了一个26肽的结构，从而使得质谱技术应用于蛋白质和肽的结构测定这一设想变为现实。 80年代末 John Fenn 发明的电喷雾电离(electrospray ionization，ESI)和Hillenkamp等人发明的基质辅助激光解吸电离(matrix assisted laser desorption ionization, MALDI)。使质谱分析生物大分子成为可能。 第二节 生物质谱仪及其相关技术 2.1 质谱仪组成 质谱仪由以下四部分组成： 进样系统——按电离方式的需要，将样品送入离子源的适当部位； 离子源——用来使样品分子电离生成离子，并使生成的离子会聚成有一定能量和几何形状的离子束； 质量分析器——利用电磁场（包括磁场、磁场和电场的组合、高频电场和高频脉冲电场等）的作用将来自离子源的离子束中不同质荷比的离子按空间位置，时间先后或运动轨道稳定与否等形式进行分离； 检测器——用来接受、检测和记录被分离后的离子信号。 2.2 离子源 离子源的功能是将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。由于离子化所需要的能量随分子不同差异很大，因此，对于不同的分子应选择不同的离解方法。 给样品较大能量的电离方法为硬电离方法，而给样品较小能量的电离方法为软电离方法，后一种方法适用于不稳定或易电离的样品。 2.2.1 离子源类型 电子轰击电离(Electron Impact Ionization，EI) 化学离子化(Chemical Ionization，CI) 场电离，场解吸(Field Ionization FD，Field Desorption FD) 快原子轰击(Fast Atom Bombardment，FAB) 电喷雾电离(Electrospray Ionization，ESI) 基质辅助激光解析电离(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI) 大气压化学电离 (Atmospheric Pressure Chemical Ionization，APCI) 常用的适用于生物大分子研究的质谱技术方法包括FAB-MS、ESI-MS、MALDI-TOF-MS等，而其中又以ESI-MS和MALDI-TOF-MS应用最为广泛，这两个新技术明显增加了质谱范围和敏感度，从而导致了新的软件和检测器的发展。 电喷雾离子化技术（electrospray ionization，ESI） 原理：在一个金属喷嘴的尖上加有2.5～6 kV高电压，经强电场作用，样品溶液从针尖小孔喷出，成为一个个带正电的液滴。在迎面吹来的热氮气流的作用下，液滴表面溶剂蒸发，液滴变小，液滴的电荷密度骤增。当静电排斥力等于液滴的表面张力时，液滴便发生崩解(库仑爆炸)，形成更小的液滴。如此形成的小液滴以类似的方式继续崩解，于是，液滴中的溶剂迅速蒸干，产生多电荷正离子，在质谱仪内被分析纪录。 Rayleigh Limit Reached + + + + + + - - + + Charged Droplets 试样离子 准分子离子 + + 其他离子 ESI-MS The hollow stainless steel needle is maintained at a few kilovolts (kV) relative to the chamber walls and the cylindrical cathode surrounding it. The liquid sample enters at a rate of 1–20 μL/ min thro