实验2—液相色谱法.docVIP

仪器分析实验讲义02 实验地点 化学楼315 实验学时 3 授课教师 实验项目 高效液相色谱法测定芦丁片中芦丁含量 预习提要 1. 液相色谱分离原理； 2. 液相色谱分类； 3. 液相色谱定量分析方法； 4. 高效液相色谱仪基本构造及特点； 5. 反相色谱与正相色谱； 6. 内标法原理及应用范围; 7. 高效液相色谱仪操作基本步骤。 实验报告部分 一、实验目的与要求 1. 了解高效液相色谱仪的基本结构及基本操作； 2. 了解反相色谱法的基本规律； 3. 掌握利用内标法进行色谱定量分析的实验方法 。 二、实验原理 1. 液相色谱法： 在液相柱色谱中，采用颗粒十分细的高效固定相，并采用高压泵输送流动相，全部工作通过仪器来完成。这种色谱法称为高效液相色谱法。主要分为四类，即液固吸附色谱、液液分配色谱、离子交换色谱和分子排阻色谱。 其中液液分配色谱是根据不同组分在两种互不相溶的液相中的分配系数不同而实现分离的，流动相的极性小于固定相的化学键合相色谱称为正相色谱，流动相的极性大于固定相的化学键合相色谱称为反相色谱。 反相色谱是目前最常用的液相色谱分离方法。如以C18烷基键合相柱，采用甲醇或乙氰的水溶液为流动相进行色谱分析。 2. 标准工作曲线法（外标法）： 3. 液相色谱仪基本构造(同学自行完成) 三、仪器与试剂 1. 仪器：液相色谱仪、微量注射器、色谱柱(C18柱250 mm×4.