anneinv和pi染色步骤及注意事项.docx

磷脂酰丝氨酸外翻分析（Ann exin V法） 磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS正常位于细胞膜内侧，但在细胞凋亡早期， PS可从细胞膜内侧翻转到细胞膜表面，暴露在细胞外环境中。磷脂酰丝氨酸的转位发生在 凋亡早期阶段，先于细胞核的改变、 DNA断裂、细胞膜起泡。体内的吞噬细胞可通过识别 磷脂酰丝氨酸来清除凋亡细胞。 Annexin-V（green ）是一种分子量为35~36KD的CeT依赖 性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合，细胞处于调亡或坏死时， Annexin-V可为 阳性（早期坏死细胞可能为阴性），是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。将 Annexin-V进行荧 光素（FITC、PE或biotin 标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪 或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 PI 和 Annexin-V 双标： 碘化丙啶（propidine iodide, PI） 是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在 凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。 因此将Annexin-V与PI 匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。 *注意：细胞凋亡时其DN耐 染性降低被认为是凋亡细胞标志之一，但这种 DNA可染性降低也可能是因为DNA含量的降 AsampleckxplaEFITC LOG FLUOR或P