色氨酸(trp)操纵子说课讲解.pptVIP

色氨酸(trp)操纵子; 由于trp体系参与生物合成而不是降解，它不受葡萄糖或cAMP-CRP的调控。 色氨酸的合成主要分5步完成，有7个基因参与整个合成过程。trpE和trpG编码邻氨基苯甲酸合酶，trpD编码邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶，trpF编码异构酶，trpC编码吲哚甘油磷酸合酶，trpA和trpB则分别编码色氨酸合酶的α和β亚基。 ; trpE基因是第一个被翻译的基因，和trpE紧邻的是启动子区和操纵区。另外，前导区和弱化子区分别定名为trpL和trpa（不是trpA）。 trp操纵子中产生阻遏物的基因是trpR，该基因距trp基因簇很远。后者位于大肠杆菌染色体图上25分钟处，而前者则位于90分钟处。在位于65分钟处还有一个trpS（色氨酸tRNA合成酶），它与携带有色氨酸的tRNATrp共同参与trp操纵子的调控作用。 ;;;;;; 弱化子 ;研究引起终止的mRNA碱基序列，发现该区mRNA通过自我配对可以形成茎-环结构，有典型的终止子特点。 ;前 导 肽;前导序列具有一个非常有意义的特点，在其第10和第11位上有相邻的两个色氨酸密码子。这一点很重要，因为组氨酸操纵子中，也具有弱化子，也具有一个类似的能编码前导肽的碱基序列，此序列中含有7个相邻的组氨酸密码子。苯丙氨酸操纵子中同样存在弱化子结构，其前导序列中也有7个苯丙氨酸密码子。这些密码子参与了trp及其他操纵子中的转录弱化机制。 ;mRNA前导区的序列分析 ;转录弱化作用 ;而当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使2-3不能配对，3-4区可以自由配对形成茎-环状终止子结构，转录停止，trp操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸（图6-24）。所以，弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置。 ;;;;;;;The trp operon is negatively regulated by the Trp repressor;The trp operator is a palindromicDNA sequence;;trp操纵子转录的调控是通过Trp阻遏物实现的，它结合于trp操纵基因序列 ，但Trp阻遏物的DNA结合活性直接受色氨酸调控，色氨酸结合Trp阻遏物，并起着一个效应分子的作用（也称之辅阻遏物）。 在有高浓度色氨酸存在时，Trp阻遏物-色氨酸复合物形成一个同源二聚体，并??紧密结合于trp操纵基因序列，因此可以阻止转录。然而当色氨酸水平低时，缺少色氨酸的Trp阻遏物以一种非活性形式存在，不能结合DNA。在这样的条件下，trp操纵子被RNA聚合酶转录，同时色氨酸生物合成途径被激活。 ;;trp操纵子的另一种转录调控是称之衰减作用（attenuation）的调控机制，这是一种将翻译与转录联系在一起的新的转录调控形式。细胞内Trp-tRNATrp浓度决定核糖体是否停留在trp mRNA中的前导序列内的两个连续的色氨酸密码子处。当色氨酸水平高和Trp-tRNATrp可利用时，起转录终止作用的发卡环结构（由区3和区4之间）形成，RNA聚合酶刚好在一个聚尿嘧啶的下游处脱离DNA模板，转录终止。;当由于细胞内色氨酸有限，Trp-tRNATrp水平低时，核糖体就停留在RNA中连续的一对色氨酸密码子处。核糖体这一瞬间的停留给出时间使得一种替换的发卡结构在新的RNA中（由区2和区3之间）形成，是一种抗终止的RNA结构，它破坏了转录终止信号，使得RNA聚合酶能够继续沿着DNA模板滑动完成转录。　　 ;;The trp operon;Attenuation in the trp operon;Attenuation – a transcriptional form of control ;Attenuation;Attenuation – Inadequate [Trp];Attenuation – Adequate [Trp];Attenuation works by have the RNA polymerase stop (terminate) before the transcription of the structural genes, but AFTER it has already started to make an RNA. The key is the region of the operon called trpL (see the figures above). ;;;;;The trp operon of E. coli;In tryptophan-poor medium;In tryptophan-rich m