普通生物化学学习方法： 酶（2）.ppt

别构激活剂：凡是和酶分子结合后使酶反应速度加快的别构效应剂（亦称正效应剂） 别构抑制剂：（亦称负效应剂） ★别构酶的主要特点： ●1. 一般是寡聚酶； 别构酶的组成： 两个部位 活性部位：与底物结合并完成催化作用 调节部位:与别构效应剂结合,调节酶活性 ● 2. 具有别构效应； 两个部位的位置： 在不同亚基上（通常） 在同一亚基的不同部位上 正效应剂通常是别构酶的底物 ● 3. υ对 [S] 作图不服从米－曼氏（Michaelis-Menten）关系式，不呈直角双曲线，而是S形曲线（正协同）或表观双曲线（负协同）。 负效应剂一般是代谢反应序列的终产物 别构酶与非调节酶动力学曲线的比较 Rs= [S]0.9 [S]0.1 1、非调节酶(米氏酶)；2、正协同效应的别构酶 3、负协同效应的别构酶 协同效应：指一个配体与酶蛋白结合后，可以 影响另一配体与酶蛋白的结合 正协同效应：指一分子配体与酶结合后可促进 下一分子配体的结合，使酶对配体的亲和 力增高，即酶愈饱和对配体的结合愈容易 负协同效应：指一分子配体与酶结合后可使酶 对下一分子配体的亲和力降低， 即酶愈饱 和对配体的结合愈困难。 负协同效应可以使酶的反应速率对外界环境中底物浓度的变化不敏感。 典型的米氏酶 Rs=81 具有正协同效应的别构酶 Rs81 具有负协同效应的别构酶 Rs 81 n为Hill系数（又称协同系数） 符合米氏方程的酶 n = 1 具有正协同效应的别构酶 n 1 具有负协同效应的别构酶 n 1 协同指数（饱和比值）： Rs= 位点被90%饱和时的底物浓度(S90%Vmax) 位点被10%饱和时的底物浓度(S90%Vmax) = 811/n 由米氏方程有 所以，符合米氏方程动力学的非别构酶的Rs=81 v = Vmax[S] Km+[S] 所以有 v = 0.9Vm = Vm[S]0.9 Km+[S]0.9 即有 [S]0.9 =9km 同理 [S]0.1 = 1 9 km 别构酶举例——大肠杆菌（E. coli）天冬氨酸  转氨甲酰酶（简称ATCase） ATCase有二个底物和CTP、ATP二个别构效应剂－－Asp、ATP是别构激活剂，CTP是别构抑制剂 ATCase（天冬氨酸转氨甲酰酶） ATCase的相对分子质量是310 000，由12条多肽链组成 每个调节亚基上有两个别构效应剂（CTP、ATP）的结合部位 完整有活性的酶包括 催化亚基（三聚体） 调节亚基（二聚体） ATCase活性调节的机理 有催化活性的构象 R型 无催化活性的构象 T型 [Asp] v 别构酶的意义 底物、CTP、ATP都是ATCase的别构效应剂，对于ATCase来说，即意味着它们可以通过别构效应影响它的催化能力（活性） 负协同效应：对于保证体内一些重要反应稳定连续地进行很有意义 正协同效应：对增强底物灵敏地调节酶活性很有意义 别构酶S形动力学曲线在细胞代谢中的意义－－可在一个狭窄的底物或调节物浓度范围内严格地控制酶的活力（可以以血红蛋白为例） （1）减少底物原料消耗 （2）避免终末产物堆积 （3）使底物浓度在曲线陡段最敏感 总之，别构酶是代谢过程中的关键酶，在代谢中起重要的调节作用；在生物体内，它们一般是催化多酶体系反应序列中的第一步反应或是位于代谢途径的分叉处。 （三）可逆共价修饰（共价修饰酶） 共价修饰(covalent modification) 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。 常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见） 乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化 腺苷化和脱腺苷化 －SH与－S－S互变 酶的磷酸化与脱磷酸化 -OH Thr Ser Tyr 酶蛋白 H2O Pi 磷蛋白磷酸酶 ATP ADP 蛋白激酶 Thr Ser Tyr -O-PO32- 酶蛋白 （四）蛋白水解激活作用 （相当于不可逆修饰） 酶原和酶原激活 （四）酶合成和降解的调节 基因 如：乳糖操纵子 代谢产物 酶 酪氨酸酶缺陷——白化病 苯丙氨酸羟化酶缺陷——苯丙酮酸尿症 胱硫醚合成酶缺陷——同型胱氨酸尿症 * 米氏常数意义： 2 Km是酶的一个特征性常数。 Km大小只与酶的性质