无菌检验操作规程.docxVIP

无菌检验操作规程 2020年4月19日 医疗器械产品无菌检验操作规程 1目的 经过无菌检验，确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。 2适用范围 适用于灭菌后医疗器械产品的无菌检验。 3检验依据 〈〈中国药典》（ GB14233.2-医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分 生物 试验方法GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准 4仪器、设备 超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力 蒸汽灭菌器、集 菌仪（器、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、 酒精灯、三角烧瓶，接种环、无菌棉签、镶子，试管架，大试管若干 等。 5无菌检验室的环境要求 5.1无菌检验应在环境洁净度 10000级下的局部百级的单向流空 气区域内进行。5.2缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空 气应保持正压，阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验 室与室外大气之间静压差应大于 10Pa。无 菌检验室的室温应保持 18~26C，相对湿度：45~65%。 5.3无菌检验室的单向流空气区、 工作台面及环境应定期按 〈〈医 药工业洁净室（区悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国 家标准进行悬浮粒子、浮游菌和 沉降菌的监测。每年至少检测一 次。 5.4无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落 数:每次操作时 在层流空气所及台面的左中右置 3个营养琼脂平板，暴 露30min ,于30~35C培养48小时,菌落数平均应不超过 1CFU律板。 6无菌检验前的准备 6.1器具灭菌、消毒 6.1.1灭菌:试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方 法灭菌。可经 电热干燥箱160C以上干烤2小时，或置压力蒸汽灭菌 器内121 C蒸汽灭菌30分钟后使用（根据灭菌效果验证决定灭菌参 数。所有的灭菌物品不应超过 2周即用毕，否则应重新灭菌。 6.1.2消毒:凡检验中使用的器材无法灭菌处理的 ，使用前必须经消 毒处理。如 无菌检验室的试管架、电子天平、工作台面、工作人员 的手、橡胶吸头等。可采用 消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换 以防止产生耐药菌株。 6.1.3标识:器具的灭菌、消毒后必须做好标识 ，标明灭菌、消毒时 间和使用有效期。 6.2人员、物料进入无菌检验室 6.2.1开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理 ，消毒时间不 得少于30min。6.2.2物料进入无菌检验室流程 6.2.2.1脱包:进入无菌检验室的物品若有双重包装的 ，需将外包装 在传递窗/缓冲间拆除后，传入试验室。 6.2.2.2消毒:进入无菌操作室的所有培养基、 供试品等的外表都 应采用适用的方 法进行消毒处理，以避免将外包装污染的微生物带入 无菌检验室。 6.2.2.3传递:查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、 消毒标 识，是否在有效 期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。 6.2.3人员进入无菌检验室流程 6.2.3.1更鞋脱衣：在一更区脱去一般区工作鞋，穿上无菌检验室工 作鞋;脱去一般区工作服。 6.2.3.2洗手:首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫 ，再用流水连 续冲洗20秒，洗净泡沫。 6.2.3.3更衣:在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服 （包括 衣、帽、口罩等，要求裤子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有 头发。 6.2.3.4手消毒：用消毒液浸泡双手 5秒以上或用浸过消毒液的棉 球擦拭双手。消毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、 75%酒精等。 6.2.3.5人员进入：经缓冲间进入无菌检验室。 6.2.4人员进入无菌检验室后，进一步用消毒液擦拭工作台面，戴无 菌手套。 7无菌检验操作要求 7.1全过程必须严格执行无菌操作，防止微生物污染。 7.2使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。 7.3所有操作均应在近火焰区进行，且不得有大幅度或快速动作，以 免搅动空气中的尘埃微粒。 7.4使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。 7.5在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生汽溶胶， 造成污染。7.6操作过程中所有的带菌物品，用后均应作消毒、灭菌 处理。可在检验过程中 随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内 ，或 在检验完成后经传递窗传至一般区 ，立即用压力蒸汽灭菌锅 121 C灭 菌30分钟。 8培养基制备 8.1需气菌、厌气菌培养基（硫乙醇酸盐流体培养基的制备 8.1.1所用试剂 酪月东（胰酶水解15.0%葡萄糖5.0g L-胱氨酸0.5g硫乙醇酸钠0.5g （或硫乙醇 酸（0.3ml酵母浸出粉5.0g氯化钠2.5g新配制的0.1%刃天 青溶液1.0ml琼脂0.75g水1000ml 8.1.2制备 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH为 弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p