微卫星检测方法.docxVIP

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  • 2020-11-25 发布于天津
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微卫星 DNA 简单重复序(SSR)也称微卫星DNA也可称为SSRP(SimpleSequenee Repeat Polymorphisms) ,STMS(Sequence-tagged microsatellites) 。其串联重复的核 心序列为1 一 6 bp,其中最常见是双核昔酸重复,即(CA) n和(TG) n每个微卫 星DNA勺核心序列结构相同,重复单位数目10一 60个,其高度多态性主要来源 于串联数目的不同。SSF标记的基本原理:根据微卫星序列两端互补序列设计引 物,通过PCR反应扩增微卫星片段,由于核心序列串联重复数目不同,因而能够 用PCR的方法扩增出不同长度的PCR产物,将扩增产物进行凝胶电泳,根据分离 片段的大小决定基因型并计算等位基因频率。 SSRM有以下一些优点:(l) 一般检测到的是一个单一的多等位基因位点; ⑵ 微卫星呈共显性遗传,故可鉴别杂合子和纯合子; (3)所需DNA量少。显然, 在采用SSF技术分析微卫星DNA多态性时必须知道重复序列两端的 DNA序列的信 息。如不能直接从DNA数据库查寻则首先必须对其进行测序。 1 微卫星DNA勺构成及特点 微卫星又称简单序列重复(Simple Se-quenee Repeats,SSR)b —般 以 1-6 个碱基为核心序列, 首尾相连组成的串联重复序列。 这种序列存在于几乎 所有真核生物的基因组中, 含量

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