急性毒性试验.docx

试验目的：急性毒性试验是在 24 小时内给药 1 次或 2 次（间隔 6-8 小时），观察动物接受过量的受 试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析 人体过量时可能出现的毒性反应、 I 期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。 一、啮齿类动物单次给药的毒性试验 （一）试验条件 动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。选用其他动物应说明原因。年龄一般为 7-9 周龄。同批 试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的 20%.实验前至少驯养观察 1 周，记录 动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。 饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分 含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。 受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。 （二）试验方法： 由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难 观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。 伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。 最大耐受剂量（MTD试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死 亡的剂量。 最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物， 观察动物的反应。 单次口服固定剂量方法（ Fixed-dose procedure ）。选择 5、50、500 和 2000mg/kg 四个固定 剂量。 实验动物首选大鼠，给药前禁食 6-12 小时，给受试药物后再禁食 3-4 小时。如无资料证明雄性 动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一 个作初始剂量， 若无有关资料作参考， 可用 500mg/kg 作初始剂量进行预试， 如无毒性反应， 则用 2000mg/kg 进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。如初始剂量出现严重的毒性反应，那就用下一个挡次的剂 量进行预试，如该动物存活，就在此两个固定剂量之间选择一个中间剂量试验。每个剂量给一只动物，预 试一般不超过 5 只动物。 每个剂量试验之间至少应间隔 24 小时。 给受试药物后的观察期至少 7 天，如动物 的毒性反应到第 7 天仍然存在，尚应继续再观察 7 天。 在上述预试的基础上进行正式试验。每个剂量最少用 10只动物，雌雄各半。根据预试的结果， 由前面所述的四种剂量中选择出可能产生明显毒性但又不引起死亡的剂量；如预试结果表明， 50mg/kg 引 起死亡，则降低一个剂量档次试验。 试验观察：给受试药物后至少应观察 2周，根据毒性反应的具体特点可适当延长。对每只动物 均应仔细观察和详细记录各种毒性反应岀现和消失的时间。给受试药物当天至少应观察记录两次，以后可 每天一次。观察记录的内容包括皮肤、粘膜、毛色、眼睛、呼吸、循环、自主及中枢神经系统行为表现等。 动物死亡时间的记录要准确。给受试药物前、给受试药物后 1周、动物死亡及试验结束时应称取动物的体 重。所有动物包括死亡或处死的动物均应进行尸检，尸检异常的器官应作病理组织学检查。固定剂量试验 法所获得的结果，参考下表标准进行评价。 单次口服固定剂量试验法结果的评价 剂量 试验结果 kg) (mg/ 存活数＜100% 100%存活毒性表现明显 100%?活无明显中毒表现 高毒(Very toxic) 有毒（Toxic ） 5.0 (LD50W25mg/kg) (LD50= 25-200mg/kg ) 用50mg/kg试验 有毒或高毒 有害(Harmful ) 50.0 用5mg/kg进行试验 (LD50= 200-2000mg/kg ) 用500mg/kg试验 0 500. 有毒或有害 LD502000mg/kg 用2000mg/kg试验 用50mg/kg试验 0 2000 用500mg/kg试验 该化合物无严重急性中毒的危险性 、非啮齿类动物的急性毒性试验（近似致死剂量试验） （一） 试验条件 动物品系：一般用6只健康的Beagleg狗和猴。选用其他种属的动物时应说明原因。年龄一 般为6-8月龄。同批试验中，试验初始动物的体重应不超过或者低于所用动物平均体重的 20%.试验前至少 驯养观察2周，观察记录动物的行为活动、饮食、体重、心电图及精神状况，择其正常、健康、雌性无孕 者作为受试动物。 饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分 含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。注明动物饲养室内环境因素的控制情况。 受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存