流式细胞术基本原理课件.ppt

流式细胞术基本原理;流式细胞术;流式细胞仪的特点;目前流式细胞仪可以检测的类别;;;当光子遇到滤片时，光子或通过滤片，或被滤片吸收，或被滤片反射。;光学滤片的种类;共有两类：散射信号与荧光信号 前向角散射信号（FSC） 反映细胞大小 侧向角散射信号（SSC） 反映细胞颗粒度 荧光信号（FL Signals）（FL1、2、3……） 胞内、胞外染色情况;;把前向散射光图和侧向散射光图的一维图像在二维图像上投影，便是我们平常所看到的流式图。 所以横坐标表示的是细胞的直径大小；纵坐标表示的是细胞的复杂程度。 两者相结合就能说明细胞种类;二维等高图和密度图;假三维图与三维图;流式细胞仪如何获取细胞信号？;前向角信号（Forward Scatter，FSC）;前向角信号：细胞的大小;FSC;侧向角信号（Side Scatter， SSC）;SSC;FL;;FSC、SSC、FL;如何分离90°角内的各种荧光信号？;荧光染料;荧光染料种类;荧光染料光谱特征;荧光分离原则;开放式光路 Calibur、Influx;封闭式光路（CantoⅡ、LSR系列、Aria系列）;分选;震荡;偏转板;几个概念;信号放大 PMT将光信号转换成电信号，调整PMT的电压，信号强度将随之改变;线性放大（lin）;对数放大（log）;电脉冲信号类型;CV值;样本流速;高流速：一般用于定性分析，如免疫分型。采集速度快,